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文献和实验的老师应该和笔者一样深有感触:实验条件、样本类型之间生物学条件、试剂特异性甚至研究人员的差异都可能产生不一致的结果,导致不准确的结论。02 我的细胞系是贴壁细胞吗?因为贴壁细胞在发生凋亡后,有可能会变得比较难贴壁,所以有必要通过离心收集所有的悬浮细胞,一并混到刮下来的贴壁细胞中一起裂解。03 裂解细胞时我超声了吗?CST 研发科学家做过对照试验,与不超声相比,超声能最大程度地、均一稳定地提取 caspase-3,得到更强的信号。因此,CST 科学家建议在加入 1X 细胞裂解液(稀释成 1X
1.完成western blot实验 步骤: 一、蛋白样品的提取: 1.弃去旧培养基,用PBS清洗2次 2.加入胰酶消化,待细胞消化完成后,加入少量培养基终止消化反应 3.吸取细胞至离心管中,尽可能完全收集,离心,2500rpm,5min 4.弃上清,加1ml PBS清洗,将其移入EP管中,再次离心,2500rpm(13000rpm也可),5min,将残液吸取完全(-80℃冰箱内放置过夜,也可长期保存) 5.向每个EP管中加入适量IP裂解液(蛋白酶抑制剂,依细胞量多少而定),轻掸
的650L生物反应器和无血清培养基进行悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫疫苗与转瓶培养工艺进行比较和分析。 1.1主要材料 细胞株:BHK21贴壁细胞株(中国兽医药品监察所) 毒 株:FMDV-O型(某兽用疫苗企业) 培养基:低血清MEM培养基(产品代号MD611)、BHK21细胞无血清培养基(北京清大天一科技有限公司) 血 清:特级新生牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司) 仪 器:5 L反应器(德国贝朗),120L和650LCLAVORUS®生物反应器(北京
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