50ul导电滤芯吸头（A）

western blot注意事项

都没有问题，然后转移到电泳槽的时候，去掉封条，把底上的凡士林擦干。 （注意，一定要擦干净，尤其是少量进入了两隔玻璃之间空腔的，因为凡士林不导电，会影响电泳的效果。）。 7）可以在海绵垫下再垫一些纸，使得它与玻璃贴的更紧密。或者在玻璃底部用琼脂糖封上。 8）因为两块玻板没有放的完全对齐，底部不在同一个平面，所以封条封不严，重新对齐后就不漏了。以后每次只要在水平的桌面上仔细对齐两块玻板，再夹紧。用手感觉一下确定在同一平面上后，放到灌胶架并压在封条上，卡紧。注意两边均匀用力，一般不会再漏

聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质

ml，甲醇125ml，用蒸馏水定容至500ml。 10．保存液 7％冰醋酸。 11．0.05％溴酚蓝 12．电泳仪 选用电子管或晶体管整流电源。电压0—600V，电流0—300mA。 13．电泳槽 圆柱型垂直电泳槽。 14．凝胶玻管 0.5～0.6cm×10cm。 15．小烧杯，50ul微量进样器，10cm长针头或腰椎穿刺针头，5或10ml注射器。 【操作步骤】 1．制备凝胶

【转帖】Western blot的原理、操作及注意事项

2.7 4 ddH2O 1.9 1.2 0 TEMED 8ul 8ul 8ul 10%APS 80ul 80ul 80ul 在胶上面加入一层蒸馏水，促进胶更好的凝集。 3)待分离胶凝集后，配制浓缩胶。(单位：ml，Total： 3.5ml) 3％ 2×Stacking. buffer 1.7 30％ Gel.sol 0.35 ddH2O 1.4 TEMED 5ul 10%APS 50ul 倒好后插入预先准备好的梳子。 4)待胶凝集好后，上样，电泳。 上层胶用60-80V电压，当样品至分离