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- 2026年04月21日
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逸微健华
- 服务名称：
外泌体表征
服务项目简介
外泌体提取完成后，需要对外泌体进行鉴定。根据国际细胞外囊泡研究协会 (ISEV) 针对囊泡研究提出的2018最小试验要求 (MISEV2018)细胞外囊泡（EVs，含外泌体）鉴定主要分为总体表征和个体表征两部分:
总体表征：建议用Western Blot或流式细胞术对阳性标志物和阴性标志物进行表征。要求至少包括1 个跨膜蛋白和1 个细胞溶质蛋白、1 个阴性蛋白质标志物。
个体表征：（1）形态表征：应用透射电子显微镜(TEM)对外泌体的形态及粒径进行表征；
（2）粒径分析：应用纳米颗粒跟踪分析(NTA)或纳米流式(NanoFCM)方法，对粒径分布进行分析。
逸微健华为您提供包括Western Blot、TEM、NTA、ELISA定量在内的全套外泌体鉴定服务。
表征方法
- Western Blot：三阳一阴对照；外泌体表面marker（指标蛋白）如CD9、CD63、CD81、TSG101、HSP70等
- ELISA定量：应用外泌体ELISA定量检测试剂盒（EV02-04-01）对外泌体进行快速定量
- 电镜检测（TEM）
- 粒径分析：对粒径分布进行分析；设备：瑞芯
客户提供
血清、血浆、脑脊液、尿液、胸水、腹水、唾液等体液、细胞上清、植物样本和其他特殊样本
送样要求
不同生物流体样本类型根据后续研究目的和方法按照要求进行样本前处理。
注：
- 血浆样本：请用EDTA抗凝管采集血液，将采集到的血液在4 ℃下1500 g，离心20 min，去除血液中的细胞；取上清，4 ℃下3000 g，离心15 min，收集上清（血浆），-80 ℃保存，足量干冰寄送。
- 血清样本：血液收集在离心管中室温条件下静置1 h进行凝固分层；然后3000 rpm室温离心10 min;取上清转至干净的离心管中。再12000 rpm、4 ℃离心10 min，取上清分装到 1.5 mL 离心管中每管0.2 mL，-80 ℃冻存，足量干冰寄送。
- 尿液样本：采集前、中、后段晨尿，4 ℃条件下2000 g离心20 min，除去细胞，-80 ℃保存，足量干冰寄送。
- 细胞上清：先用200-300 g离心10 min，再用3000 g离心10 min，最后0.22 μm过膜或者10000 g离心30min。
交付结果
- 外泌体粒径、浓度检测报告
- 外泌体ELISA定量检测结果
- WB检测结果（三阳一阴）
- 电镜图片（提供结果标准：100纳米3张，200纳米3张，合计6张）
7-10个工作日
案例展示
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文献和实验间充质干细胞外泌体（MSC EXOs）近年来已经在伤口愈合、神经损伤、肝病以及新冠肺炎等领域被广泛研究应用。不少研究表明，在各种损伤和疾病模型中，MSC EXOs 可以作为间充质干细胞的替代选择。 第四军医大学去年就在干细胞领域权威期刊 Stem Cell Research & Therapy 发表文章 [1]，发现 MSC EXOs 逆转肝纤维化，是间充质干细胞（MSCs）治疗肝脏疾病的重要机制。MSC EXOs 正逐渐成为再生医疗领域的「新武器」，也为临床疾病研究提供新思路。
外泌体（Exosomes）作为当前科研界的热度话题，很多人觉得它很神秘，不知道它在疾病治疗或发生、发展中扮演什么样的角色，今天我们跟大家一起基于文献来探讨一下外泌体具有的功能。 先回顾一下外泌体的基础知识。外泌体是细胞分泌到胞外的一种囊泡（Extracellular Vesicles，EVs），其大小为 30-150 nm，具有双层膜结构和茶托状形态，含有丰富的内含物（包括核酸、蛋白和脂质等），参与细胞间的分子传递。 所有的细胞都能分泌外泌体，但是不同细胞分泌的外泌体不管在数量
细胞上清外泌体细胞上清外泌体提取图解过程 1.核对样本 2.离心，3000g，15min； 3.离心后样本（有略微沉淀） 4.将样本转移至新的 50ml 管并加 ECS 试剂; ECS 与试剂有明显分层； 震荡混匀； 5.在 4 度冰箱静置 2H 以上，离心 10000g，60min； 6.离心后的样本（沉淀明显，沉淀中富含外泌体） 将上清吸出留下沉淀，将离心管倒扣于纸上自然晾干残留的上清液； 7.加 PBS 重悬沉淀； 用 PBS 洗脱后的沉淀 8.离心进一步去除
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