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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
30
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 巴西果仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4222 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| RatMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAkit 大鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-PAX5/FITC 荧光素标记配对盒基因5抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 细胞角蛋白20(CK-20)ELISA试剂盒 ,英文名: CK-20 ELISA Kit | Anti-CD14/Biotin 生物素化CD14抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Ratleoopichormone,LHELISAKit 大鼠促黄体激素(LH)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-HVEM/TNFRSF14/FITC 荧光素标记坏死因子受体超家族成员14抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanai-ribosomalPproteinaibody,ARPA/Rib-PELISAKit 人抗核糖体P蛋白抗体(ARPA/Rib-P)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-HBsAg 人乙肝表面抗原抗体(包被)Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| MouseInsulin-likegrowthfactor2,IGF-2ELISAKit小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-GFP/FITC 荧光素标记绿色荧光蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 对虾黄头病病毒(YHE)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T | Anti-CNP/CNPase C型尿肽抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 可溶性坏死因子样细胞凋亡弱诱导因(sTweak)ELISA试剂盒 ,英文名: sTweak ELISA Kit | Anti-VEGF-D 血管内皮生长因子D型抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanindoleamine2,3-dioxygenase,IDOELISAKit 人吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-CD44v6 CD44V6抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| MouseomeinELISAKit小鼠网膜素(omein)ELISA试剂盒规格:96T/48T | Anti-Phospho-MYPT1 (Ser507)/FITC 荧光素标记0酸化肌球蛋酸酶抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| 载脂蛋白A4(Apo-A4)ELISA试剂盒 ,英文名: Apo-A4 ELISA Kit | Anti-Phospho-Tie2 (Tyr992) 0酸化血管生成素受体2抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| 脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)活性测试盒 紫外分光光度法 50管/48样 | Anti-CD23/Fc EpsilonR II /FITC 荧光素标记CD23抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| HumancoagulationfactorⅫ,FⅫELISAKit 人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-CDK5 周期素依赖性激酶5抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| Ratheatshockprotein40,hSP-40ELISAKit 大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | 巴西果仁源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒Anti-FGF1/FITC 荧光素标记酸性成纤维细胞生长因子Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| Humanaialnaiureticfactor,ANFELISAKit 人心纳素(ANF)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 | Anti-PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 0酯酶Cβ3抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 热休克蛋白20(HSP20)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP20 ELISA Kit | Anti-phospho-P53 (Thr18) 0酸化抑制基因P53抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验,我们的目标是通过将选择和去除试剂盒与我们创新的文库制备相结合,提供完整的工作流程解决方案。要了解有关我们解决方案的更多信息,可阅读我们微信公众号的相关文章。 RNase H 介导的消耗 RNase H 是一种核糖核酸内切酶,可特异性切割 RNA:DNA 双链体中的 RNA 分子,同时保持 DNA 分子的完整性。它通常用于基于探针法的去除流程,属于特定的酶介导消耗类别。这种去除方法使用与目标分子(通常是 rRNA 和/或珠蛋白 mRNA)杂交的特定 DNA 探针。反应中使用的探针的密度可以变化
组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。5. 溶解曲线不止一个主峰 引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。 引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。 镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的 mix 试剂盒。 模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。6. 扩增效率低 反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。 反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。 反应体系中有PCR反应抑制
、凸起、半透明或灰白色菌落。淋球菌具有氧化酶和触酶,分解葡萄糖产酸,不分解蔗糖、麦芽糖和乳糖。细菌培养是检验诊断淋球菌感染的“金标准”,目前仍为诊断淋病最可靠的方法。但淋球菌对外环境抵抗力极弱,对冷、热、干燥和化学消毒剂大都敏感;且临床标本的采集、输送、培养接种方式等都可能影响检验结果的准确性。 3.2.3 快速检测法 采用淋病检测试纸进行检测,与比色卡阳性颜色相比,试纸变色一致则确认为阳性。 3.2.4 荧光定量PCR法 具体操作步骤严格按照PCR试剂盒说明书进行操作。最后
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