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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
44
- 英文名:
Washington University Polyomavirus(WUPyV)WU
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P4198 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Porcine iercellular adhesion molecule 2 (ICAM-2/CD102) ELISA Kit 猪细胞间粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA试剂盒 | GRASP65 英文名称: 高尔基体外周膜蛋白p65抗体 0.2ml |
| 小鼠αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)免疫试剂盒 Mouse α-L-iduronidase,IDUA ELISA Kit | phospho-GCN2 (Thr667) 英文名称: 0酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗体 0.1ml |
| 人胰腺癌标志物CA242ELISA检测试剂盒HumanPancreaticcarcinomamarkers-CA242ELISAKit 96T/48T | MAML3 英文名称: 主导控制样蛋白3抗体 0.2ml |
| Human plasminogen / plasmin (PL/Fbn) ELISA Kit 人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 | ROR alpha 英文名称: 维相关孤儿受体α抗体 0.2ml |
| 人白血病抑制因子(LIF)ELISA检测试剂盒HumanLeukemiainhibitoryfactor,LIFELISAkit 96T/48T | IKK beta 英文名称: KB抑制蛋白激酶β抗体 0.1ml |
| 小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)免疫试剂盒 Mouse hepatitis B virus e aigen,HBeAg ELISA Kit | phospho-TSC1(Thr417) 英文名称: 0酸化结节性硬化症蛋白1抗体 0.1ml |
| 人钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)抗体(IgG)免疫试剂盒 Human keyhole limpet hemocyanin(KLH)aibody IgG ELISA Kit | NPC2 英文名称: 尼曼匹克C2前体蛋白抗体 0.2ml |
| Human ai mitochondrial aibody (AMA) ELISA Kit 人抗线粒体抗体(AMA)ELISA试剂盒 | TSPAN15 英文名称: 四分子交联体15抗体(四旋蛋白) 0.2ml |
| Rabbit urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 兔尿激酶型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)ELISA试剂盒 | HIP2 英文名称: 泛素蛋白连接酶E2抗体 0.2ml |
| 小鼠抗双链DNA抗体/天然DNA抗体(IgG)免疫试剂盒 Mouse ai-double sanded DNA aibody(IgG)ELISA KIT | Phospho-NMDAR1(Ser896) 英文名称: 0酸化谷酸受体1抗体 0.1ml |
| Mouse coagulation factor II (F II) ELISA Kit 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒 | MUL1 英文名称: E3泛素连接酶MUL1抗体 0.2ml |
| Human acid phosphatase (ACP) ELISA Kit 人酸性0酸酶(ACP)ELISA试剂盒 | TAZ 英文名称: 转录共激活因子TAZ抗体 0.2ml |
| 人神经保护因子(CVNPF)ELISA检测试剂盒HumanCobravenomneuronalprotectivefactor,CVNPFELISAKit 96T/48T | 多瘤病毒探针法荧光定量PCR试剂盒KLF6 英文名称: 转染抑癌基因KLF6抗体 0.1ml |
| 猪粘蛋白/粘液素1(MUC1)免疫试剂盒 Pig Mucin-1,MUC1 ELISA Kit | PTP1B 英文名称: 蛋白酪酸0酸酶-1B抗体 0.1ml |
| 兔子α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒 Rabbit Ierferon α,IFN-α ELISA Kit | PCDHGA12 英文名称: 原钙粘蛋白γA12抗体 0.2ml |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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过,你要先确定你选择哪个方法。如果你想用 Taqman Probe 法,请你选择 primer express 3.0。如果你想用 SYBR 法,我建议你选 primer premier 5.0。 为什么?请往下看。 3)两种引物设计软件之比较。 先说专门为 real-time PCR 定制的 primer express 3.0 。这个软件其实是为 Taqman 探针法设计的,而不适合SYBR染料法。 如果你用探针法,强烈推荐。打开软件就会发现,在方法选择的下拉菜单中
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实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
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