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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
57
- 英文名:
Coccidioides immitis
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 粗球孢子菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3416 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh Bak Bcl-2同源拮抗剂抗体 规格 0.1ml | Hsp-60 ELISA Kit 大鼠热休克蛋白60Multi-class antibodies规格: 48T |
| MN(Human metanephrine) ELISA Kit 人变 96T | Adenovirus hexon protein: 腺病毒六邻体蛋白抗体 0.2ml |
| ABP: 雄激素结合蛋白抗体 0.1ml | Anti-GCS 谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白 | Rhesus antibody Rh ALR 肝再生增强因子抗体 规格 0.1ml |
| 正常大鼠肾细胞;NRK-52E | BMP-7(Mouse Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白7 96T |
| TNFRSF17 Others Human 人 TNFRSF17 / BCMA / CD269 人细胞裂解液 (阳性对照) | 单克隆抗体 小鼠单抗 0.1 |
| Anti-phospho-CaMK2a (pThr286)/FITC 荧光素标记抗0酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh PGF2 α 前列腺素F2a抗体 规格 0.2ml |
| NUP54: NUP54抗体 0.2ml | CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Anti-IAA/FITC 荧光素标记吲哚-3-乙酸抗体/植物生长素单克隆抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | SF17(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌细胞) |
| P53 大鼠P53蛋白Multi-class antibodies规格: 48T | 人小气管上皮细胞(HSAEpiC)(5×105 ) |
| IgG(3D3)/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 0.1ml | 人间充质干细胞-脐带 |
| CEP55: 中心体蛋白55kDa抗体 0.2ml | SiHa细胞,子细胞 人鼻咽癌母系细胞,CNE-2Z细胞 CL-0240V79(仓鼠肺细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Rhesus antibody Rh IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的驴抗兔IgG 规格 0.1ml | 粗球孢子菌探针法荧光定量PCR试剂盒内脏脂肪细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
| 鸡IgG 干粉 10mg/50mg 国产 | MDA-MB-436(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| CCR-4(C-C chemokine receptor 4) 细胞表面趋化因子受体4抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | AK4 Others Human 人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验抗真菌感染免疫 近年来,真菌感染的发病率和病死率有所上升,原因与滥用广谱抗生素引起菌群失调和病原体感染或应用药物等导致的免疫低下有关。其中,二相性(dimorphic)真菌如荚膜组织胞质菌、皮炎芽生菌、粗球孢子菌等,在泥土等环境中呈丝状菌,有孢子和菌丝;当感染免疫低下个体后变为酵母而致病。而条件致病性真菌如念珠菌、曲霉、新生隐球菌等,对于健康个体通常不致病,AIDS患者、糖尿病以及放化疗患者后由于免疫力低下容易导致条件致病真菌感染。 1.抗真菌固有免疫 完整
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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