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- 2025年09月29日
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文献和实验2000 4 4 500 6 4 120 8 4 70 10 4 10 16 2、白磷还原法制备5 nm胶体金 (1) 取250 ml三角瓶一个，加79 ml双蒸水，1 ml 1%氯化金，并用0.25 M K2CO3将溶液调至中性（pH7.0）。 (2) 取0.2 ml饱和磷/乙醚溶液加到1.5 ml试管中，再加0.8 ml乙醚，混匀。取0.7 ml加入溶液（1）中(磷有毒且易燃，操作请带手套，多余的磷溶液用CuSO4进行中和)。 (3) 室温下轻轻摇匀15
强度进行稳流电泳，当电压达65V时改为稳压电泳。 3．在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。 四．转膜 1．电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备： 湿转使用常规电转液：Tris 3.0g，Gly 14.4g， M-OH 200ml，加去离子水至1,000ml。干转则取此转移液，每50ml加入10%SDS180ul。 浸泡NC膜：将NC膜平铺于去离子水面，靠毛细作用自然吸水后再完全浸入水中10min以排除气泡，随后浸泡入转移液中。PVDF膜则在M-OH中浸泡20min以上后转入转移液中
【资源】个人整理 Western Blot（步骤简略，但注意事项、经验总结、基本原理很全面）
，3min。三．电泳1．上样前将胶板下的气泡赶走。2．所有蛋白样品调至等浓度后上样，样品两侧的泳道用等体积的1×loading buffer上样，Marker也用1×loading buffer调整至与样品等体积。2．以初始电压为45V时的电流强度进行稳流电泳，当电压达65V时改为稳压电泳。3．在目的蛋白泳动至距胶下缘1cm以上结束。四．转膜1．电泳结束前20分钟左右戴上手套开始准备：湿转使用常规电转液：Tris 3.0g，Gly 14.4g， M-OH 200ml，加去离子水至1,000ml。干转则取
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