0.1ml白色PCR 8联管（含管盖）

简单高效的植物总RNA提取利器！

RNA沉淀，13000 rpm离心3分钟。 弃上清，盖上管盖，低速离心数秒使管壁上的乙醇沉降到管底，用200 µl吸头吸尽残留的乙醇，保留管底及管壁的白色RNA沉淀。室温静置5分钟干燥RNA。 根据RNA沉淀量加入适量RNase-free水（土豆块茎样本50 µl，桑叶样本200 µl）旋涡震荡溶解RNA，在超微量分光光度计上测量RNA的浓度，然后进行琼脂糖凝胶电泳。 按照2×One Step SYBR Green RT-qPCR Mix的说明书操作，对提取到的土豆RNA进行荧光PCR

99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密！

和鉴别，特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对 DNA 扩增没有影响，但在设置实时荧光定量 PCR 的反应时，与透明耗材相比，我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材，以实现灵敏和准确的荧光检测。 qPCR 使用透明和白色耗材的结果比较（A）与透明孔相比，白色孔 Ct 值更低（灵敏度更高）。（B）白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。 白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高 qPCR 数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时，更多的信号被反射回检测器，从而增加信噪比。此外，白色管壁可阻止荧

目的基因片段的PCR扩增与克隆

片段。 3.目的片段的克隆 纯化的片段连接到克隆载体pGEM-Tvector，转化导入宿主菌E.coliDH5α，通过蓝白斑筛选，PCR扩增鉴定后测序，获得的含所需要的目的片段的质粒。 （1）pGEM®-TEasy载体系统 I.描述 pGEM®-TEasy载体系统可用于PCR产物的克隆。这种载体是通过EcoRⅤ酶切pGEM®-5Zf(+)和pGEM®-TEasy载体，并在3’末端加入胸腺嘧啶构建的。插入位点3’-T突出端可提高PCR产物的连接效率，因为3’-T突出端可以防止载体的自身环化，并且为