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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
35
- 英文名:
Rhodococcus equi
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3983 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| 人囊虫病抗体(CYT Ab)免疫试剂盒 Human Cysticercosis aybody,CYT Ab ELISA Kit | Rabbit anti-MG IgG/RBITC 罗丹明标记的兔抗长爪沙鼠IgG 0.3ml |
| 小鼠白喉IgG抗体免疫试剂盒 Mouse Diphtheria IgG aibody ELISA Kit | Mouse Anti-rabbit IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗兔IgG 0.1ml |
| 人维生素B2(VB2)免疫试剂盒 Human vitamin B2,VB2 ELISA Kit | RSV IgG 合胞病毒 IgG(间接法二步法) |
| Human ubiquitin ligase (E3/UBPL) ELISA Kit 人泛素连接酶(E3/UBPL)ELISA试剂盒 | ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管紧张素Ⅱ受体1 96T |
| 人伤寒抗体(St-Ab)免疫试剂盒 Human salmonella typhi aibody,St-Ab ELISA Kit | Annexin V 膜粘连蛋白-5(抗原) 0.5mg |
| 小鼠整合素α5(Itgax/CD11c)免疫试剂盒 Mouse Iegrin alpha-X,Itgax/CD11c ELISA Kit | 山羊抗小鼠 IgG(H+L)/TRITC 0.1ml 红色荧光,Jackson公司分装 |
| 人整合素α2(ITGA2)免疫试剂盒 Human ITGA2 ELISA kit | (Mouse Gastrointestinalcancer Marker-CA199) ELISA Kit 小鼠胃肠癌标志物CA199 96T |
| Human phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 人0酸化细胞外信号调节激酶(pERK)ELISA试剂盒 | Human triple-helical peptide,THP ELISA Kit 人螺旋肽 96T |
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| 小鼠可溶性血栓调节蛋白(sTM)免疫试剂盒 Mouse Soluable Thrombomodulin,sTM ELISA Kit | BCDF(Human B cell differetiation factor) ELISA Kit 人B细胞分化因子 96T |
| 人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)免疫试剂盒 Human h-FABP ELISA Kit | CD8 大鼠CD8分子 96T |
| Human cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 人嗜环蛋白/亲环素A(CyPA)ELISA试剂盒 | Human flagellin ELISA Kit 人鞭毛蛋白 96T |
| Chicken soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 鸡可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒 | 马红球菌探针法荧光定量PCR试剂盒Melamine/Bov IgG 三聚胺偶联IgG 1mg |
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| 兔子胆固醇酯转移蛋白(CETP)免疫试剂盒 Rabbit cholesteryl ester ansfer protein,CETP ELISA Kit | GGT(Human gamma glutamyl transpeptidase) ELISA Kit 人γ谷酰转移酶 96T |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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实时荧光定量PCR从1996年美国AppliedBiosystems公司推出实时荧光定量PCR技术以来,该技术已经越来越广泛的应用到各类RNA的研究中,成为研究RNA必不可少的实验手段之一。目前比较常用的方法有两种:(1)TaqMan荧光探针法:该方法在特异性探针的两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当探针完整时,荧光基团发光被淬灭基团吸收;在PCR扩增过程中,探针被降解,荧光基团与淬灭基团分离,发出可被检测到的荧光,以此来监测整个PCR过程。(2)SYBR荧光染料法:该方法
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