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文献和实验ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,得标准贮备液A (5 000 μg/ml)。 精密量取丙酮标准贮备液A 1 ml置50 ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得标准液B(100 μg/ml)。 3结果 3.1气相色谱 空白溶剂(水)峰的保留时间约为0.5 min;丙酮标准液峰的保留时间约为4.3 min;检测限调节检测灵敏度和进样量,信噪比为3∶1使峰高为基线噪声的3倍左右,本方法测得丙酮检测限为2 ng。 3.2标准曲线的绘制 分别精密量取丙酮
于10ml容量瓶中,用DMF溶解并定容。 3.2 标准曲线的制备及结果取上述系列标准溶液进样,以测得丙酮峰的峰面积对丙酮浓度作回归,得到的回归方程为y=44241x+15818 r=09993 3.3 检出限在上述色谱条件下,测得的丙酮最低检出限为2μg(S/N=3)。 3.4 精密度与回收率对该方法的精密度和回收率测试进测试,加样回收率为9984%,RSD为087%(n=6)。 3.5 样品测定测定结果见表1。 4 讨论
内的,而酶只有在甘油浓度 具体操作如下:在 1.5 mL 离心管中依次加入DNA(1 μg/μl)20 μg10× 酶切 buffer 4.0 μl限制性内切酶(10 U/μl)5.0 μl加 ddH2O 至 500 μl在最适温度下消化 1-3 hr。消化结束时可取 5 μl 电泳检测消化效果。如果消化效果不好,可以延长消化时间,但超过 6 hr 已没有必要。或者放大反应体积,或者补充酶再消化。如仍不能奏效,可能的原因是 DNA 样品中有太多的杂质,或酶的活力下降。消化后的 DNA 加入 1/10
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