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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
51
- 英文名:
Hepatitis B Virus(HBV)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 乙型肝炎病毒通用型探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3645 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh Bcl2L2/BCL W Bcl-2样蛋白2抗体 规格 0.1ml | Renin ELISA Kit 大鼠肾素Multi-class antibodies规格: 48T |
| fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 大鼠趋化因子 96T | Histone H3 (Di Methyl K36): 二甲基化组蛋白H3抗体 0.1ml |
| ATP5E: ATP5E蛋白抗体 0.2ml | Anti-GABABR1 gamma氨基B型受体1抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml |
| 小鼠小胶质细胞;BV2 | Rhesus antibody Rh ANGL2/ANGPTL2 血管生成素样蛋白2抗体 规格 0.1ml |
| 原代软骨细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100ml | L-Selectin/CD62L ELISA Kit 大鼠L选择素 96T |
| ESAM Others Human 人 ESAM 人细胞裂解液 (阳性对照) | 庆大霉素单克隆抗体 小鼠单抗 0.1 |
| Anti-Pdx1/FITC 荧光素标记胰十二指肠同源异型盒基因抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh Phospho-Ack1(Tyr284) 0酸化Ack1抗体 规格 0.1ml |
| TrkB: 酪酸激酶B抗体 0.1ml | CL-0332Dami(人巨核细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Anti-HOXA10 /FITC 荧光素标记HOXA10抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | NCI-N87(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 VSIG8 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| EGF 大鼠表皮生长因子Multi-class antibodies规格: 48T | PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| AACT(Alpha-1-Anti-chymotrypsin) α-1抗胰糜蛋白酶 10mg | 人骨肉瘤细胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] |
| CD4: CD4抗体 0.1ml | CAL 27-EGFP-puro(pLVT7慢病毒构建稳定株)人舌鳞癌细胞 CAL 27-EGFP-puro (pLVT7 leiviral consuct stable sain) of human tongue squamous cell carcinoma DMEM+10% FBS+2μg/ml puromycin |
| Rhesus antibody Rh DRG1 GTP发育调控结合蛋白1抗体 规格 0.2ml | 乙型肝炎病毒通用型探针法荧光定量PCR试剂盒卵巢上皮细胞培养基OEpiCM-prf |
| 羊抗人C3 0.5ml 国产 | 人食管癌细胞 英文名称: KYSE410 |
| DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多巴胺β羟化酶(抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg | RAB27B Others Human 人 RAB27B 人细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验荧光定量PCR简介荧光定量PCR检测技术诞生至今已10多年的时间,而其应用一直都没广泛展开,究其原因,无外乎受制于相关仪器、试剂和技术的发展。近期,尤其是08年以来,仪器和试剂是遍地开花,这也使科研人员均跃跃欲试,都想借此技术使自己的研究能突飞猛进,发展势头通过查找每年所发表的文章数可一目了然。据有关统计,在 Medline 数据库中,用“Taqman” 或 ”real time PCR” 作为关键词检索,1996 年是19 篇,1999 年157 篇,到2003 年
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
也大叹“Very expensive, especially for small projects”。 咱们做实验的,对试剂的要求自然是1.质量可靠 + 2.价格相宜,前者保证实验早出结果,出好结果,不要太多折磨,后者则是要老板承受得起,毕竟没有病人替我们买单。因此自行设计定制标记探针就是多数“第三世界”实验室的选择。Taqman探针法的第二大类产品就是不带探针引物的通用探针法定量检测试剂盒——有酶、Buffer、内参等等配套试剂,模版引物探针自备。大家关心的问题不外是:1.哪一家探针合成标记
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