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100
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信帆生物
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500ml
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文献和实验【求助】紧急求助:信号转导阻断剂使用时,是否必须使用无血清培养基
剂+不含血清 C组不含阻断剂 分组后测一下阻断率就知道了. doctormy 并不是必须使用无血清培养基,只要有平行对照即可 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
,5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基,将 iPSCs 接种于明胶上,添加 10ml iPSCs(I)培养基,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 定向内胚层分化 4、在 60mm 培养皿中加入 2ml Matrigel,室温静置 2h 并添加 DMEM-F12 培养基至完全没过 Matrigel。 5、用不含 Ca2+/Mg2+ 的 PBS 冲洗 iPSCs 后,加入 300μl Accutase,37℃ 孵育
第 2 天内胚层分化培养基,替换为每孔 5ml 预热的第 3 天内胚层分化培养基,并将平板放回 37℃,5%CO2 的培养箱中。 8、24h 后,吸出第 3 天内胚层分化培养基,用不含 Activin A 的第 3 天内胚层分化培养基洗涤细胞一次。此时在显微镜下观察细胞,应该存在扁平的 DE 组织,该组织包含非常少的 3D 结构。 DE 分化为中肠和后肠 9、从 24 孔板中吸出培养基,每孔滴加 5ml 预热的中肠和后肠分化培养基。每 24h 更换一次新鲜中肠和后肠分化培养基,直至 96h 。 10
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