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大量
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艾研
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500U
| BioReady LA Taq | 博日 | BSA13M2 | 240 | 500U | 科研 | 套 | 132 | 96 | 77 | 72 | / | 5000U |
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文献和实验| BioReady LA Taq | 博日 | BSA13M2 | 240 | 500U | 科研 | 套 | 132 | 96 | 77 | 72 | / | 5000U |
我做大鼠心肌的醛固酮合酶RT-PCR,都2个月了,一点结果都没有,偶尔出一条带还不是我所需要的条带,最近有人看了我的基因序列发现局部GC 含量高,建议用la Taq,就又花了300多元反复作了多次还是没有结果,用脑及肾上腺的cDNA作阳性对照也同样,而用同样的cDNA能扩出其他4对目的基因。真郁闷啊,快过年了,老板说节前做不出来节后先上班,业余时间作试验,一定要做出来。看来春节过不好了!那位高手能指点迷津,在下多谢了。 我的条件是94度2min预变性,94度30se,58-68度30-40
Site-Directed Mutagenesis with LA-PCR Technology
transformation steps are necessary (9 ). As based on the Long and Accurate (LA)-PCR-technology with the improved enzyme, TaKaRa LA Taq , this method provides the high fidelity and introduction of site-directed mutation into longer DNA can be achieved.
在丁香园见过很多大佬分享载体构建经验,所以我这里写的T载体构建只能算是入门级,给新手提供一点思路,有什么不足之处还希望大家多多指正。 我克隆的这个片段大小是1.8kb,用的是TaKaRa的LA-Taq酶做的PCR。 反应体系:5*buffer 5 ul MgCl2 5 ul dNTPs 8 ul Primer 1 1 ul Primer 2 1 ul LA-Taq 0.5 ul cDNA 1 ul (1ug左右基因组DNA) ddH2O up to 50 ul
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