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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
27
- 英文名:
Enterobacter sakazaki
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 阪崎肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3503 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Anti-PCX/FITC 荧光素标记足细胞特异蛋白抗体Multi-class antibodies规格: 0.2ml | PDGF-AB(Mouse Platelet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 小鼠血小板衍生生长因子AB 96T |
| ADH/VP/AVP(Human antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 人抗利尿激素/血管加压素/精氨酸加压素Multi-class antibodies规格: 48T | Rhesus antibody Rh SMAD5 细胞信号转导分子SMAD5抗体 规格 0.1ml |
| MEIS2: 同源盒蛋白Meis2抗体 0.2ml | Rhesus antibody Rh IgG(3D3)/Cy3 Cy3标记的鼠抗人IgG单克隆抗体 规格 0.1ml |
| MICA Others Human 人 MICA 人细胞裂解液 (阳性对照) | Anti-RECK/FITC 荧光素标记金属蛋白酶抑制因子RECK抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| MN-h, 小鼠海马神经元 人肝上皮细胞,THLE-3细胞 EL4(淋巴瘤细胞) | Human Beta-glucosidase ELISA Kit 人β葡糖苷酶Multi-class antibodies规格: 48T |
| 大鼠上皮细胞完全培养基 100mL | L-ENK: 亮酸脑啡肽抗体 0.1ml |
| IgG/RBITC 罗丹明标记的羊抗小鼠IgG 0.3ml | Anti-phospho-Bcl-xL(Ser62) 0酸化Bcl-xL(pSer62)抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml |
| BCL2 interacting protein: BCL2相互作用蛋白质抗体 0.2ml | 大耳山羊肾细胞;LDG-2 皮下结缔组织细胞,A9细胞 CT26.WT[CT26WT]细胞,小鼠结肠癌细胞 |
| Rhesus antibody Rh CD82/KAI1 转移抑制蛋白1抗体 规格 0.1ml | 青霉素/链霉素溶液P/S |
| CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 96T | TNFSF11 Protein Human 重组人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 (Fc 标签) |
| Anti-HisX6/6His/His tag(CT) /FITC 荧光素标记聚组氨酸抗体/抗His tag(C端)标签抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 5-8F, 人高转移鼻咽癌细胞系 淋巴瘤,EL4IL-2细胞 PC-12(大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤) |
| PDZK3: 前列腺癌激活蛋白抗体 0.2ml | 非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4+;VERO/IgRCD4+ |
| Anti-CD68/FITC 荧光素标记CD68抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 阪崎肠杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒Lec1细胞,卵巢细胞 人肝癌细胞,FL62891细胞 CL-0152MDA-MB-453(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 |
| Iba-1(Ionized calcium bindingadaptor molecule-1) 离子钙接头蛋白抗原Multi-class antibodies规格: 0.5mg | 癌 英文名称: A498 |
| 轴索过度生长抑制因子受体/Nogo受体抗体 Anti-Nogo R/NGR 0.1ml | 人非小细胞肺腺癌细胞;NCI-H1975 |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验杆菌、寄生虫病等在内的数十种荧光定量PCR试剂盒,购买方便,价格便宜,并获得了国家相关认证。 值得一提的是鉴于当前流行病的频发以及实时荧光定量PCR技术的实际应用,国内外已将实时荧光定量PCR检测技术强制应用于相关行业并相继制定了国际、国家、及行业标准作为法律依据。例如: SN/T 1632.3-2005 奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 荧光PCR方法 GB/T 19438.1-2004 禽流感病毒通用荧光RT
如何获得高质量、高可信度的荧光定量PCR结果--高质量cDNA标准
过程,无RNA损失。这就需要裂解液即可迅速裂解细胞,高效的保护RNA,又不会影响高效反转录反应,且对于后续荧光定量PCR无抑制作用。FastLine细胞到cDNA快速制备试剂盒(KR105,TIANGEN),一站式完成从细胞到cDNA的快速制备,同时去除基因组DNA残留,整个操作流程仅需50 min,获得的cDNA不但可以直接进行荧光定量 PCR还可以和正常提取RNA后进行第一链反转录后得到的cDNA一样,冷冻保存供以后使用,是从少量细胞快速制备cDNA的最佳选择,并可实现高通量检测。 图
过敏源、转基因、乳品企业阪崎肠杆菌等检测。相比以往的药敏试验,接种感染实验以及免疫学等检测方法,不仅样本量需求少,而且操作简便,省时,灵敏度高,特异性好,结果更可靠。同样的还可应用于物种鉴定,基因分型等定性分析研究。 real time PCR技术不仅可用于定性分析,更多的是用于定量分析。其中绝对定量可用于(1)病毒及病原菌定量分析;(2)导入基因拷贝数解析;(3)GMO(转基因生物)定量检测。相对定量则多用于(1)差异显示结果验证,例如某一基因在生物体内不同发育阶段,不同组织器官的表达
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