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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
22
- 英文名:
Coenurus cerebralis
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 脑多头囊虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3420 |
【检验原理】
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| ADM R, Adrenomedullin receptor 肾上腺髓质素受体(抗原) 0.5mg | NET1: 神经上皮细胞转化基因1抗体 0.2ml |
| CD161c: CD161c抗体 0.2ml | Anti-LEF-1/FITC 荧光素标记淋巴增强因子-1抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh EAAT3 胶质细胞谷氨酸运载蛋白3抗体(神经/上皮细胞谷氨酸运载蛋白) 规格 0.1ml | IL-17(Human Interleukin 17) ELISA Kit 人白介素17Multi-class antibodies规格: 48T |
| 肺泡上皮细胞Many types of cells包装:5 ×105次方(1ml) | sIgA/FITC FITC标记的兔抗人分泌型IgA 100ug |
| CXCL14 Protein Human 重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白 | CK1: 细胞角蛋白1抗体 0.1ml |
| NSC,大鼠神经干细胞 人脑视神经胶质瘤细胞,Hs 683细胞 RF/6A(猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞) | Rhesus antibody Rh DCIR/CLEC4A C型凝集素结构域家族4成员A抗体 规格 0.2ml |
| FOXD2: 叉头蛋白D2抗体 0.2ml | Flt-1/VEGFR1 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
| Anti-STAT6 信号转导和转录激活因子6抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | IL33 Protein Canine 重组狗 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白 |
| Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 荧光素标记抗CD44抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 8910PM细胞,人卵巢癌细胞 小鼠细胞,EMT6细胞 肾小管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml) |
| Sialoadhesin: 唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素1抗体 0.2ml | PLA2G7 Others Human 人 PLA2G7 / PAFAH 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Rhesus antibody Rh IgG-Fc/Cy3 Cy3标记的兔抗小鼠IgG-Fc 规格 0.1ml | 人胚肺二倍体细胞;HL |
| Rhesus antibody Rh KCNG4/KV6.3 离子通道蛋白G蛋白4抗体 规格 0.2ml | SDC4 Others Mouse 小鼠 Syndecan-4 / SDC4 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| CEA 癌胚抗原定性(一/二步夹心法) 96T | 脑多头囊虫探针法荧光定量PCR试剂盒IFNG Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 恒河猴 IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 |
| DPP2: 溶酶体丝酸蛋白酶DPP2抗体 0.1ml | NCI-H157(人非小细胞肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-UCP-2/FITC 荧光素标记线粒体脱偶连蛋白2抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | IL1R1 Others Human 人 IL1R1 / CD121a 人细胞裂解液 (阳性对照) |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
【求助】关于脑神经毒性的一个信号通路实验设计(体内和体外,关键是体外),请教中……
新手上路多包涵 拟通过体内外实验证明某化合物的神经毒性(通过Ca2+-CaMKII-CREB途径),设计如下,第一次做这样的实验,真心的、虚心请教各位老师指点 初步设计为:“由氧化应激导致兴奋性氨基酸增加,通过NMDA受体激活钙通道” 1、体内试验 染毒后,取脑海马进行如下检测: 采用邻苯二醛柱前衍生高效液相色谱法检测仔鼠海马兴奋性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)含量; 利用NO和NOS试剂盒测定NO含量和NOS活性
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