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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
46
- 英文名:
African Swine Fever Virus(ASFV)
- 保质期:
保存期限为12个月
- 供应商:
上海联祖
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50T
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| 非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 | 50T | LZ-P3208 |
本试剂盒即开即用,用户只需要提供样品DNA模板,引物和探针经过优化,灵敏性高,提供阳性对照,便于区分假阴性样品,特异性高,引物是根据指标DNA高度保守区设计,不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应,既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级,本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】
【使用方法】
试剂准备(试剂准备区)
稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例)。
由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液,最好用带芯枪头,下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头,在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头,在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理(样本处理区)
2.1如果有N个样品,最好设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取:核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂,操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应(20μL体系,在样品制备室进行)
3.1如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于PCR阴性对照(用水做模板),1个用于PCR阳性对照(直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板)。
| Rhesus antibody Rh Pin1 肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl抗体 规格 0.1ml | H1N1 Nucleoprotein: A型流感病毒核蛋白抗体 0.2ml |
| Rhesus antibody Rh GPBB/PYGB 脑糖原0酸化酶抗体 规格 0.2ml | Anti-RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 荧光素标记核糖体蛋白S6激酶家族RSK3抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml |
| TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4)-associated protein) 激素受体相关蛋白/孤儿素受体相关蛋白(抗原) 0.5mg | RANTES/CCL5(Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted) ELISA kit 人正常T细胞表达和分泌因子Multi-class antibodies规格: 48T |
| A498 肾癌 | IgG/Cy7 Cy7标记的兔抗马IgG 0.1ml |
| HCT-8/FU 人结肠癌尿嘧啶耐药株 | CDKN1C: 周期蛋白依赖激酶抑制因子1C抗体 0.1ml |
| NCI-H446细胞,人小细胞肺癌细胞 大鼠神经胶质瘤细胞,C6细胞 CM-H111人成骨细胞完全培养基100mL | Rhesus antibody Rh D.Aspartic acid D型天冬氨酸抗体 规格 0.1ml |
| FAR2: 脂肪酰辅酶A还原酶2抗体 0.2ml | CD45/T200/LCA 1:200 浓缩液 0.1ml 进口分装 |
| Anti-TANK TANK抗体Multi-class antibodies规格: 0.1ml | HO-8910PM(人高转移卵巢癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-CD86/B7-2 /FITC 荧光素标记CD86抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | 貂源细胞 淋巴细胞白血病细胞,A3细胞 3T3-swiss albino细胞,小鼠胚胎成纤维细胞 |
| SATB2: DNA结合蛋白2抗体 0.2ml | CTLA4 Others Human 人 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| Rhesus antibody Rh IgM/Gold 胶体金标记的兔抗猴IgM 规格 0.5ml | Hs 746T(人胃癌细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Rhesus antibody Rh Junctophilin 3 连接蛋白JPH3抗体 规格 0.2ml | IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人细胞裂解液 (阳性对照) |
| RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗红细胞抗体 96T | 非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒人胚肺成纤维细胞;MRC-5 |
| Dnmt3L: DNA甲基转移酶3L抗体 0.2ml | IBRS-2(猪细胞) 5×106cells/瓶×2 |
| Anti-TGF- Alpha /FITC 荧光素标记转移生长因子–α抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml | A-375 [A375], 人恶性黑素瘤细胞株 |
【注意事项】
1.PCR 操作各阶段应严格分区操作,避免交叉污染。
2.试剂盒各组分使用前应充分融化混匀,离心数秒后使用。
3.各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4.待测标本若不及时检测,应保存于-20℃或-70℃。
5.样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6.PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7.本试剂盒仅用于科研使用,不做为临床诊断使用。
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文献和实验恩泽康泰进军家畜外泌体研究领域——全面解锁猪/牛/羊/鸡外泌体研究
的潜在指标(Animal. 2021 Apr;15(4):100182. IF=3.6 2区),等研究。 b.疫病/家畜疾病 急性肺损伤、猪流行性腹泻病毒感染、非洲猪瘟病毒(ASFV)、亚洲鸡瘟感染传播等,在养猪等家畜业都有一定的发病率,给患病动物造成了极大的痛苦,同时也给养殖户造成了巨大的经济亏损,严重的可造成患病动物死亡。因此,阐述外泌体介导的家畜疾病发病和感染病毒传播机制,也是一个需要进行研究的方向,以期为家畜养殖生产中相关疾病防控提供
相关专题 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光 Taqman 探针设计、实时荧光PCR探针的选择、引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交 探针(荧光共振能量传递探针)和分子
所特有的,下游引物为通用引物就可以了。 荧光定量PCR检测方法有SYBR Green染料法和TaqMan探针法。前者需要调整引物浓度以及引物扩增效率,把引物二聚体调整到越小越好;探针法则需要设计荧光探针,这其中由于MGB探针需要碱基数量少和特异性好的特点而被推荐。 探针设计位置有3个:完全与miRNA序列相同、在miRNA与RT引物的交叉点、完全在RT引物上;这其中又有正向和反向互补两种情况。至于探针要设计在那个位置,根据自己试验情况而定,本人以为效果都差不多。 四、试验操作流程
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