- ￥900
- wksubio
- WS5011W
- 国内
- 2026年03月05日
13 年金牌会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
γ- Glutamate kinase（ γ- GK reagent kit
- CAS号：
WS5011W
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
48T
本试剂盒仅供科研使用
γ-谷氨酸激酶（γ-GK）酶活测定试剂盒说明书
（货号：WS5011W 微板法 48 样）
一、产品简介：
γ-谷氨酸激酶(γ-GK，EC 2.7.2.11)是脯氨酸生物合成途径中的关键酶之一。催化由谷氨酸生成脯氨
酸途径的第一步反应。
本试剂盒利用γ-GK 催化谷氨酸磷酸化，进一步与转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与
Fe3+形成 Hydroxamate-Fe3+复合物 ，通过检测该复合物在 535 nm 波长处的 OD 值，进而得出γ-GK
酶活力大小。该酶催化的反应方程式：ATP+L-glutamate=ADP+L-glutamate 5-phosphate。
二、试剂盒组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂二
粉体 mg×1 瓶
4℃保存
临用前甩几下，使粉体落到底部，
再加入 6mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体 5mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
粉体 mg×1 支
4℃保存
临用前甩几下，使粉体落到底部，
再加入 1.1mL 蒸馏水溶解备用。
试剂五
液体 10mL×1 瓶
4℃保存
三、所需的仪器和用品：
酶标仪、96 孔板、水浴锅、离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
四、γ-谷氨酸激酶（γ-GK）活性测定：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样本情况，熟悉实验流程，避免实验
样本和试剂浪费！
1、 样本制备：
① 组织样本：
取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液，冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上清液待用。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取。
② 细菌/细胞样本：
先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；
12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。
③ 液体样本：澄清的液体样本直接检测，若浑浊则离心后取上清检测。
2、上机检测：
① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 540nm。
② 所有试剂解冻至室温。
③ 在 EP 管中依次加入：
试剂（μL）
测定管
对照管
样本
50
50
试剂一
50
40
试剂二
50
50本试剂盒仅供科研使用
2
试剂三
50
50
试剂四
10
混匀，37℃水浴 60min
试剂五
100
100
混匀，反应 2min 后，8000rpm，4℃离心 10min，取 200μL
上清液于 96 孔板中，535nm 处分别读取吸光值 A，△A=A
测定管-A 对照管（每个测定管须设一个对应的对照管）。
【注】若ΔA 的值在零附近徘徊，则可加大样本量 V1（如增至 80μL，则试剂一相应减少），则
改变后的加样体积 V1 需代入计算公式重新计算。
五、结果计算：
1、按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克组织蛋白在每小时内催化产生 1 nmol 谷氨酰羟肟酯所需的酶量定义为
一个酶活力单位。
γ-GK 活性(nmol/h/mg prot)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(V1×Cpr)÷T=480×ΔA÷Cpr
2、按样本鲜重计算：
单位定义：每克组织在每小时内催化产生 1 nmol 谷氨酰羟肟酯所需的酶量定义为一个酶
活力单位。
γ-GK 活性(nmol/min/g 鲜重)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(W×V1÷V)÷T=480×ΔA÷W
3、按细菌/细胞数量计算：
单位定义：每 104个细胞在每小时内催化产生 1 nmol 谷氨酰羟肟酯所需的酶量定义为一
个酶活单位（U）。
γ-GK 活性(nmoL/min /104 cell)= [ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.96×△A
4、液体中酶活力的计算：
单位定义：每毫升液体在每小时内催化产生 1 nmol 谷氨酰羟肟酯所需的酶量定义为一个
酶活力单位。
γ-GK 活性(nmol/min/mL)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷V1÷T=480×ΔA
V---提取液体积，1mL；
V1---加入反应体系中样本体积，0.05mL；
V2---反应体系总体积：3×10-4 L；
d---96 孔板光径，0.5cm；
T---反应时间，60min=1h；
W---样本质量，g；
ε---摩尔消光系数，2.5×104 L/mol/cm；
Cpr----样本蛋白质浓度，mg/mL，建议使用本公司的 BCA 蛋白含量检测试剂盒。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
为在动物细胞中与氨基酸的吸收有关的肽转移、变化的循环。在脑、肾及肠道中起作用。由结合于细胞膜的γ -谷氨酰转肽酶的作用，从细胞内存在的 5mM浓度的谷胱甘肽将γ -谷氨酰基转移于细胞外的氨基酸的α -氨基，生成γ -谷氨酰胺基氨基酸，并将其吸收于细胞内；它再分解时，将α -氨基酸贮于细胞内。谷氨酰胺基及半胱氨酰甘氨酸可经游离氨基酸重新形成谷胱甘肽，而重新被利用。最后由于 ATP的分解而将氨基酸吸收于细胞内。此循环除了脯氨酸外，对多数氨基酸也都适用
γ-谷氨酰转肽酶γ-glutamyl transpeptidase
催化γ -谷氨肽 氨基酸→γ谷氨酸 肽反应的酶， EC． 2． 3． 2． 2。能以谷胱甘肽为基质。（参见谷氨酸循环）。
测定都使用贝克曼公司质控品做质量控制，且每天做二个水平的质控。（具体详见生化室内质控SOP） 分析范围： 当标本∶试剂为1∶30时，L-γ-谷氨酰转移酶测定范围：5-3000U/L,超出此范围应稀释后测定，L-γ-谷氨酰转移酶测定一般用生理盐水稀释。
技术资料需要更多技术资料 索取更多技术资料
γ-谷氨酸激酶(γ-GK)试剂盒,微板法
￥900
