猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环2型三重核酸检测试剂盒

公司产品仅供科研研究实验、不得用于临床！

产品名称	规格	货号
猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环2型三重核酸检测试剂盒	50T	LZ-P2215

【检验原理】
本试剂盒即开即用，用户只需要提供样品DNA模板，引物和探针经过优化，灵敏性高，提供阳性对照，便于区分假阴性样品，特异性高，引物是根据指标DNA高度保守区设计，不会跟其他微生物的DNA发生交叉反应，既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级，本产品足够50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应。
【试剂组成】




【使用方法】
试剂准备（试剂准备区）
稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/μL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL荧光PCR专用模板稀释液，最好用带芯枪头，下同。
3. 在6号管中加入5 μL 1×10E7拷贝/μL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
4. 换枪头，在5号管中加入5 μL 1×10E6拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
5. 换枪头，在4号管中加入5 μL 1×10E5拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/μL的标准曲线样品。放冰上待用。
6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
样本处理（样本处理区）
2.1如果有N个样品，最好设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.2 核酸提取：核酸提取可以采用上海抚生实业有限公司的核酸提取或纯化试剂，操作方法按照说明书进行。
3.Probe qPCR反应（20μL体系，在样品制备室进行）
3.1如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。

大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-2 7721肝癌细胞，7721细胞 HuT78(T淋巴细胞白血病细胞)	HMGB-1 ELISA Kit 大鼠高迁移率族蛋白B1Multi-class antibodies规格： 48T
H4(人脑神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0328CEM/C1(人急性淋巴细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2 小耳猪肺细胞;SEP-L1	HHIP： HHIP蛋白抗体 0.2ml
SW480(人结肠癌细胞) 5×106cells/瓶×2	Anti-Hemagglutinin (H2N2) 流感病毒血凝素抗体(H2N2)Multi-class antibodies规格： 0.2ml
BEL/FU 人肝癌尿嘧啶耐药株	Rhesus antibody Rh ADORA1/Adenosine A1 Receptor 腺苷A1受体抗体 规格 0.1ml
CHL   中国仓鼠肺细胞	CT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降钙素 96T
BIU-87(人膀胱癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M030小鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL 人急性单核细胞白血病细胞;THP-1	Rhesus antibody Rh WNK4 WNK4抗体 规格 0.1ml
Anti-PLGF/FITC 荧光素标记小鼠胎盘生长因子抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	Rhesus antibody Rh PCDHGB2 原钙粘蛋白γB2抗体 规格 0.2ml
NR5A2/LRH1： 成纤维细胞核受体Nr5a2抗体 0.2ml	CM-H124人脑微血管内皮细胞完全培养基100mL
Anti-IL-17RC/IL-17RL/FITC 荧光素标记白介素17受体C抗体IgGMulti-class antibodies规格： 0.2ml	P3X63Ag8.653(小鼠骨髓瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 L6(大鼠成肌细胞)
MIP-1 Alpha 小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1αMulti-class antibodies规格： 48T	IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人细胞裂解液 (阳性对照)
Rabbit Anti-IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗猪IgG 0.1ml	人膀胱癌细胞;5637(HTB-9)
C7orf64： 7号染色体开放阅读框64抗体 0.2ml	Ke-3细胞，人肾癌细胞 大鼠鼻咽癌细胞,FAT细胞 CL-0186PIEC(猪髋动脉内皮细胞 )5×106cells/瓶×2
Rhesus antibody Rh Dog IgM/APC APC标记的兔抗犬IgM抗体 规格 0.1ml	猪细小病毒/伪狂犬野毒/圆环2型三重核酸检测试剂盒人表皮角质细胞总RNAHEK NA
品名 规格 备注	HCT116, 人结直肠癌细胞
CD86/B7-2 CD86抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg	人表皮黑色素细胞-深色素裂解物HELM-d L

【注意事项】
1．PCR 操作各阶段应严格分区操作，避免交叉污染。
2．试剂盒各组分使用前应充分融化混匀，离心数秒后使用。
3．各组分不得与其他产品或不同批号的相应成分进行互换。
4．待测标本若不及时检测，应保存于-20℃或-70℃。
5．样品的处理应该严格按照生物安全规范操作。
6．PCR 操作人员应具有经验和受过专业培训。
7．本试剂盒仅用于科研使用，不做为临床诊断使用。