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热敏双链DNA特异性核酸酶(H
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33
12个月
上海邦景
2-8℃
100U/1000U
描述:
热 敏 双 链 DNA 特 异 性 核 酸 酶 (Heat labileds-DNA-specific Nuclease ,又名 ezDNase 或 HLdsDNase),为双链特异性核酸酶。其特异性的识别降解双链 DNA,对单链 DNA 或 RNA 几乎无活性,其降解 dsDNA的能力比 ssDNA 高~5000 倍。除此外,该酶降解双链 DNA的能力比 bovine DNaseI 高~30 倍,因此特别适用于去除RNA 样品中的基因组 DNA 污染。该热敏型双链 DNA 核酸酶可将 DNA 降解为 2~8bp 的产物,且 55℃ 5min 可使该酶不可逆失活,同时又能保持 RNA 和 ssDNA 的稳定性。除此外,本酶适合于,对基因组样品进行酶法片段化反应。储存:-20℃ 可保存 3 年。活性定义: 1 单位指 25°C 条件下 15min 将 10μg 基因组DNA 消化至 80%的产物<500bp,所需的酶量。使用注意事项(1)1×dsDNase Buffer:20mM Tris-HCl pH8, 5mM MgCl2。该酶需要 1~5mM MgCl2。(2)该酶对 K+敏感,反应体系中推荐 K+浓度低于 40mM。(3)通常在 RT 反应中的用量为 0.1~0.5U/20 μl 体系。(4)任何浓度的 SDS、盐酸胍均抑制该酶活性。(5)该酶的最佳反应温度为 25~37℃,42℃ 30min 后活性损失 70%。使用实例 1(对基因组 DNA 进行片段化反应)1. 按以下组分配制反应体系基因组 DNA 10 μg10×dsDNase Buffer 2.5 μlHL dsDNase (2 U/μl) 0.5-1 μlRnase Free H2O Up to 25 μl2. 室温 25°C 孵育 15min,55~65°C 5min 加热失活。使用实例 2(基因组 DNA 的去除)1. 按以下组分配制反应体系基因组 DNA 1 μg10×dsDNase Buffer 2.5 μlHL dsDNase (2 U/μl) 1 μlRnase Free H2O Up to 25 μl2. 室温 25°C 孵育 30min,55~65°C 5min 加热失活。此时基因组 DNA,通常 90%以上的产物被消化至<15bp
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