- ￥780 - 5460
- 邦景
- BJ-PJ6670
- 国产
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
32
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1000U/10KU
| 规格： | 1000U | 产品价格： | ￥780.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 10KU | 产品价格： | ￥5460.0 |
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| T5核酸外切酶 | BJ-PJ6670 | 1000U | 780 |
| T5核酸外切酶 | BJ-PJ6670 | 10KU | 5460 |
描述：
T5 核酸外切酶沿 5’-3’方向降解 DNA，它可降解双链DNA、单链 DNA 和缺刻的质粒 DNA。它既能从 5’-末端起始降解 DNA，也能从线性或环状双链 DNA 的切刻或缺口处起始降解 DNA，但不能降解超螺旋双链 DNA。基于以上特性，T5 核酸外切酶可应用于 Gibson 组装。
储存：-20℃可保存 3 年。
活性定义：1 单位指在 50 μl 反应体系，37°C 条件下，30分钟内能从双链 DNA 底物上催化产生 1 nmol 的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量。
使用注意事项：
（1）1×T5 Exo Buffer：50mM KAc，20mM Tris-Ac pH 7.9，10mM Mg(Ac)2，1mM DTT。该酶在 PCR Buffer 中也具有活性。
（2）该酶的最佳反应温度为 37°C，在 50°C 也具有一定活性，因此可用于 Gibson 组装。
使用方法：
1.建立如下反应体系
模板 DNA 1 μg
10×T5 Exo Buffer 5 μl
T5 Exonuclease (10 U/μl) 1 μl
ddH2O upto 50 μl
2. 37°C，30min。
3. 加入 EDTA 至总浓度为 11mM，终止反应。
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文献和实验在核酸水解酶中，是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶，与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶，及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等；后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌（ Lac-tobacillus acidophilus）核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease，spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶（spleen phosphodieste- rase）。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA，从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3． 1． 16． 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解，但用 DNaseⅡ或普氏微球菌（ Micrococ-cus pyogenes）核酸酶处理，则可以完全水解。对碱基序列无特异性，但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ，但最适 pH在有 2× 10
率。 核酸酶污染的过夜鉴定 所有的限制性内切酶 与1μg 底物DNA在50μl反应体系中，采用推荐的NEBuffer温育过夜。比较酶切1小时的特征带型和过夜酶切的带型。如果两种情况下带型均明显、没有改变，则说明测试的酶中不存在非特异性的DNA酶。我们报道了可以温育过夜的最大酶单位数。 核酸外切酶污染鉴定 所有的限制性内切酶与1μg 单双链混合的、3H标记的E.coli DNA (200,000 cpm/μg)在50μl反应体系中
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