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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
37
- 保质期:
12个月
- 供应商:
上海邦景
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
100ml
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| Western一抗二抗去除液 | BJ-PJ6665 | 100ml | 234 |
描述:
Western 一抗二抗去除液,用于 Western Blot 中转移了蛋白的膜的重复利用。在 Western Blot 中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测 Actin、Tubulin 等内参蛋白或检测其它蛋白进行比较。Western 一抗二抗去除液可变性已经结合的抗体,使其失活,从而将同一张膜再用于其它抗体的杂交。与其它类型的一抗二抗去除液相比,该试剂不破坏抗原,处理过程中膜上抗原不丢失,因此可重复应用的次数更多、灵敏度更高。
特征
操作简单快速不会造成抗原蛋白的损失。
储存:室温可保存 2 年。
注意:该试剂为强烈的氧化剂,实验时务必做好防护工作。
如试剂接触到皮肤,请用大量的水冲洗,并尽快就医。
操作方法
(1) 将杂交完毕的膜置入蒸馏水中,室温漂洗 5min。
(2) 漂洗结束后,弃去蒸馏水。
(3) 加入适量 Western 一抗二抗去除液(至少可覆盖膜表面),室温孵育 15min。
(4) 孵育结束后,弃去 Western 一抗二抗去除液。
(5) 加入适量蒸馏水,室温漂洗 5min×4 次;漂洗结束后弃去蒸馏水。注意:每次漂洗务必将废液倒干净。
(6) 然后进行封闭等后续操作,直至完成 Western Blot。
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文献和实验【求助】western检测肿瘤细胞的 nf-kb p65表达时用的转膜条件是什么
yangcroom 请问大家,用western检测肿瘤细胞的 nf-kb p65表达时用的转膜条件是什么?多少V多少分钟?一抗二抗孵多久?我用的是中杉分装的nf-kb p65的抗体。还要注意些什么? yangcroom 顶一下! shichong 100v2h,一抗4°过夜,二抗1h yangcroom 谢谢 shichong ,我准备提总蛋白做的NF
llh刘丽华 请教高手我最近做western blot,结果总是不理想,目的条带总是很淡,上样量已经是60ug了,封闭用的是5%脱脂奶粉,我还应该怎么改进哦?下面是我的结果,采用的是ECL化学发光,凝胶成像系统拍照,下面一条是我的目的条带。 麻烦各位帮帮忙吧! Mostino 转膜应充分,并提高第一抗体的使用量! 成其瑞 用好点的抗体 volano
,还借用师兄师姐的二抗多次,一样是空白结果,所以排除一抗二抗的问题。3.配胶浓度问题:换了好几种分离胶浓度,仍无条带。4.孵育时间问题:一开始一抗过夜,二抗 2 小时孵育,最后改为一抗过夜,后再平遥一小时,二抗过夜,结果仍无条带。5.样本问题:将样本送到师兄和厂家那里能做出结果,师兄的样本借我后,仍做不出结果,排除样本问题。6.TBST 洗膜液浓度问题:借用师兄的洗膜液配置牛奶和洗膜,仍无条带。7.运气问题:为了驱赶不好的运气,菜鸟师姐和淑女师妹回家呆了半个多月,求神祈福,查找各种 Western
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