- ￥5850
- 邦景
- BJ-PJ6560
- 国产
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
47
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
16KU
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)无甘油 | BJ-PJ6560 | 16KU | 5850 |
描述：与Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段相比，Bst 3.0 DNA聚合酶具有更佳的等温扩增活性和更强的逆转录活性。无论以DNA还是RNA为模板，该酶都具有5’-3’的DNA聚合酶活性和强烈的链置换活性，但该酶5’-3’和3’-5’的外切酶活性缺失。
在以RNA为模板的LAMP实验中，可实现单酶系统反应。该酶在60-65°C之间具有很好的反转录活性，可有效解决具有二级复杂结构的RNA模板的反转录，而Bst 2.0 DNA 聚合酶和Bst DNA 聚合酶大片段无此活性。
单位定义：
一个活力单位即在 65°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
储存：-20℃ 可保存 3 年。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers：16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
使用注意事项：
(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度，Isothermo Buffer中没有 Mg2+，通常情况下，在 6-8 mM Mg2+条件下可获得较好的 LAMP 结果。
(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
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文献和实验) 基本 PCR程序 PCR 反应体积为 25μL ，包括：灭菌的超纯水、 PCR 缓冲液 (1x) 、 dNTP 混合物 (200μM each) 、引物 (0.04–0.6μM each); DMSO, 甘油或 BSA (5%); Taq DNA 聚合酶 (1–2 U/25μL) 和基因组 DNA 模板 (150ng/25μL) 。先加入水，其它组分可以任意顺序加入，加样在冰上进行，加样完成后反应管直接从冰上转入预热
Shift Assay ) 凝胶迁移实验是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术。这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合体在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理。当核转录因子与一条人工合成的特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。 发展: 从发展史来看,这项实验技术起初是用32P同位素标记人工合成的寡核苷酸形成探针,但是由于同位素的放射
2O 4.10g0.5MEDTA（PH 8.0） 20ml用NaOH调PH值 6.5 , DEPC水定容到1L，室温避光放置备用。▲1x MOPS:10x MOPS 30ml加DEPC水270ml，用时现配。▲4x RNA Loading buffer:10x MOPS 400ul甘油（高压过） 200UL溴酚兰 10ul甲醛(37%) 72ul去离子甲酰氨 310ulEDTA(0.5M PH 8.0) 8ulErBr(10mg/ml
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