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- 2026年04月24日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
143TK人胸腺激酶缺陷性细胞系
- ATCC Number：
/
- 细胞类型：
科研细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
10
- 英文名：
143TK
- 生长状态：
/
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
143TK人胸腺激酶缺陷性细胞系
- 物种来源：
143TK人胸腺激酶缺陷性细胞系
- 相关疾病：
143TK人胸腺激酶缺陷性细胞系
- 组织来源：
143TK人胸腺激酶缺陷性细胞系
- 规格：
1x10^6
细胞特性：
1） 来源：见说明
2） 形态：请直接向我司客服索取
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
6） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验基因机能营救 function rescue by gene
指对因某基因产生变异而引起异常的细胞，人为地引入具有正常机能的基因，恢复其表现形质而言。例如使在胸腺嘧啶脱氧核苷激酶基因缺陷（ tK- ）的小白鼠 L细胞，吸收疱疹病毒分离出的胸苷激酶基因与磷酸钙凝胶的混合物，表现形质转换成 tK＋ ，此时一般认为引入的基因是在细胞中加合起来的，而不是用正常基因靠遗传的重组来代换有缺陷的基因。
制备单克隆抗体骨髓瘤细胞的选择 目前可用于制备McAb的骨髓瘤细胞系较多，这些细胞经药物8-AG、5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)或6-巯基鸟嘌呤(6-TG)诱导出酶缺陷型细胞系。如缺乏次黄嘌呤一鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)，因为HGPRT＋ 细胞利用8-AG后，合成毒性核苷酸而死亡，只有HGPRT- 细胞能在含8-AG的培养液中生长，或缺乏胸腺嘧啶核苷激酶(TK)和次黄嘌呤-腺嘌呤磷酸核糖转移酶(HAPRT)等，这些细胞系不能通过补救途径合成DNA，只能通过主要途径合成
抗体或者产生抗体的某种链，医学教育|网搜集整理但不能分泌；②是次黄嘌呤鸟嘌呤核苷酸转移酶（HGPRT）和胸腺嘧啶激酶（TK）的缺陷型。因为这种缺陷型的瘤细胞正常的核酸合成途径被氨基喋吟（aminopterin）阻断后，由于缺失这些酶，即使补充它的底物次黄嘌呤（H）和胸腺嘧啶（T），核酸合成的旁路也不能起到救援的作用，结果导致瘤细胞死亡。而杂交瘤细胞因带有B细胞的全套基因，在HAT存在的条件下借助于HGPRT和TK的作用通过替代的核酸合成途径能正常合成DNA和RNA.所以杂交瘤能正常地生长繁殖而被选择
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