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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
769-P人肾癌细胞系(769-P)
- ATCC Number:
/
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
769-P
- 生长状态:
/
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
769-P人肾癌细胞系(769-P)
- 物种来源:
769-P人肾癌细胞系(769-P)
- 相关疾病:
769-P人肾癌细胞系(769-P)
- 组织来源:
769-P人肾癌细胞系(769-P)
- 规格:
1x10^6
细胞特性:
1) 来源:见说明
2) 形态:请直接向我司客服索取
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
6) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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文献和实验yzzaici888 大家好,本人最近一直在做p-p38的磷酸化,但是一直都做不好。希望各位大侠帮助解决: 蛋白上样量80-100ug,半干转膜70min,5%BSA封闭70min,一抗CST(#9211) 1:500加,4℃孵育过夜,二抗1:8000加室温70min。曝光出的结果很不好,杂带很多,也分析不出那条是目的条带,且没有趋势,见下图 15001046419
V-P试验的概述是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助: (1)培养基:葡萄糖蛋白胨水培养基。 (2)方法:将待检菌接种于上述培养基中,于35℃培养48h后加入甲液(6%α-萘酚酒精溶液)和乙液(40%KOH溶液),振摇。 (3)结果:在数分钟内出现红色为阳性;如无红色出现且于35℃4h后仍如故者即为阴性。 (4)应用:本试验常与甲基红试验一起使用,因为前者阳性的细菌,后者通常为阴性。
1. Treat cells. For PC12 or NIH 3T3 cells a moderately confluent 60 mm plate is used. 2. Aspirate media. Rinse cells with PBS, aspirate.3. Lyse cells in 200 uL of SDS sample buffer (100 ℃). Immediately scrape the cells off the plate with a rubber
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