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- 国产/进口
- 2025年07月13日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
HBE人支气管上皮细胞
- ATCC Number：
/
- 细胞类型：
科研细胞
- 肿瘤类型：
/
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
10
- 英文名：
HBE
- 生长状态：
/
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
/
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
正常
- 免疫类型：
HBE人支气管上皮细胞
- 物种来源：
HBE人支气管上皮细胞
- 相关疾病：
HBE人支气管上皮细胞
- 组织来源：
HBE人支气管上皮细胞
- 规格：
1x10^6
细胞特性：
1） 来源：见说明
2） 形态：请直接向我司客服索取
3） 含量：>1x10^6 细胞数
4） 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
5） 用途：仅供科研使用。
6） 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
（2）T25瓶复苏的存活细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验实验材料： 1. 手术切除的含支气管的正常肺组织 2. 胰蛋白酶/EDTA液：0.05%胰蛋白酶，0.5mmol/L EDTA 3. 6孔培养板：用多聚赖氨酸包被 4. 不含Ca2+ 和Mg2+的1×PBS（pH=7.2），添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素和200000U/L庆大霉素，pH7.4 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪，眼科镊 6. 离心管（15ml、50ml） 实验方法： 1. 将分离的两片肺叶组织用含双抗的1×PBS
冲洗，以除去血液和粘液。 2. 将气管或支气管的一端结扎，另一端插套管并固定。用注射器经套管注入1%中性蛋白酶，至气管充盈为止。将气管浸泡于PBS中，在37℃条件下消化20min。 3. 用注射器抽取培养液，将注射器插入套管，反复冲洗，以分离气管上皮细胞。然后，将气管或支气管游离端的结扎线剪断，回收管腔内的细胞悬液。 4. 用200目不锈钢网筛过滤，将滤液离心（1000r/min，10min）。弃上清液后，再用培养液洗涤离心1次。 5. 用培养液悬浮沉淀细胞，调整细胞
利用 Millicell 培养小室培养皮肤及肺类器官的实验方案
细胞培养技术支持将人支气管上皮细胞从 16HBE14o-等细胞分化为成熟的肺表型。使用 ALI 细胞培养技术培养的支气管上皮细胞可以形成极化细胞层和紧密连接，并且可以分化和呈现功能性纤毛。ALI细胞培养方法依赖于 Millicella/Transwell插入式细胞培养小室来支持类体内观察到的假复层粘液纤毛表型的发展。 图 1. 在传统2D（左）与3D气液界面(ALI)（右）中培养的气道上皮细胞。 气液界面细胞培养方案 用ECM 混合物涂抹组织培养瓶：
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