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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
CTLL-2(T细胞)
- ATCC Number:
/
- 细胞类型:
科研细胞
- 肿瘤类型:
/
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
CTLL-2
- 生长状态:
/
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
/
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
正常
- 免疫类型:
CTLL-2(T细胞)
- 物种来源:
CTLL-2(T细胞)
- 相关疾病:
CTLL-2(T细胞)
- 组织来源:
CTLL-2(T细胞)
- 规格:
1x10^6
细胞特性:
1) 来源:见说明
2) 形态:请直接向我司客服索取
3) 含量:>1x10^6 细胞数
4) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5) 用途:仅供科研使用。
6) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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文献和实验功能,由各种亚群组成,不同TCRs产生的组合多样性被认为是γδ T细胞在不同癌症中发挥不同作用的原因(图1)。而人的γδ T细胞根据TCRs使用Vδ1链和Vδ2链主要被分为两大类[4]。人血液中的γδ T细胞大多使用Vδ2链[5],它通常与Vγ9链配对[6]。Vγ9Vδ2 T细胞占外周血γδ T细胞的50-95%,具有强大而广泛的肿瘤细胞毒性、MHC依赖性、对程序性细胞死亡-1(PD-1)的抑制作用有相对的抵抗力、IL-17A产生量少、激活NK细胞细胞毒性等特点,特别适用于肿瘤免疫[7]。 图1. γδ
αβT细胞的攻击。 相比之下,γδT细胞是固有免疫系统中的效应细胞,这些细胞以MHC不受限制的方式发挥作用,使它们成为癌症免疫治疗的理想介质。最近的研究表明,γδT细胞对各种类型的癌细胞具有强大的细胞毒性作用。然而,γδT细胞仅占循环淋巴细胞的一小部分,临床效益并不令人满意。目前,如何在体外获得数量充足且功能强大的γδT细胞正在成为研究的热点,一些改进方法,如双特异性抗体和CAR-γδT可能突破γδT细胞的局限性,提高抗肿瘤效果。 γδT细胞的激活 人类外周血γδT细胞主要表达Vδ2链
㈠ 原理:小鼠胸腺瘤细胞系EL4的某些亚克隆细胞表面具有高密度IL-1受体,在IL-1诱导下产生高水平的IL-2,通过用IL-2依赖株CTLL-2检测IL-2的生物学活性,从而反映检测样品中IL-1的水平。 ㈡ 操作步骤: 免疫学实验技术论坛 http://bbs.bbioo.com/forum-140-1.html 1. 用EL4细胞两步法检测IL-1活性
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