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- 2025年07月12日
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文献和实验计上，使样品层面与温度计的水银球的中部同一高度，用酒精灯以3℃/min升温，升至100℃时，调节加热器使温度每分钟升1℃，样品出现液滴时的温度作为初熔温度，样品全部熔化时的温度作为全熔温度。 4、含酸量的测定 4.1 应用试剂 98%中性乙醇；10g/L的酚酞指示剂； 4.2 测定步骤 称取0.35g样品（称准至0.0002g），置于250ml锥形瓶中，加25ml中性乙醇，轻摇使样品溶解，加20ml新经煮沸并冷却的水和2滴酚酞指示剂，以0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定到呈粉红色。同时做
在少量蒸馏水中，再稀释至1000ml。 4. 混合指示剂 1份0.1％甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。 5．40%氢氧化钠溶液 40g氢氧化钠溶解于蒸馏水中，再稀释至100ml。 6．0.05mol／L盐酸标准溶液 （四）操作步骤 1．样品处理 精密称取0.2～2.0g固体样品或2～5g半固体样品或吸取10～20ml液体样品（约相当氮30～40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加人0.2g硫酸铜、3g硫酸
，否则基因组 DNA 裂解成小片段，有可能对质粒造成污染。SDS 作用是结合蛋白质，为下一步做准备。5. 加 150μl 用冰预冷的溶液 Ⅲ，盖紧管口，将管倒置后温和地振荡 10 秒钟，使溶液 Ⅲ 在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，之后将管置于冰上 3-5 分钟。溶液 Ⅲ5 mol/L 乙酸钾 60 ml冰乙酸 11.5 ml水 28.5 mlTips：这一步主要作用是中和，避免质粒长时间在碱性条件下造成损伤，此时质粒溶解在中和液上清中。SDS 的钾盐是不溶于水的，也直接导致与之结合的蛋白质沉淀，由于基因
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