- ￥702 - 11700
- 邦景
- BJ-PJ6584
- 国产
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1ml/25ml
| 规格： | 1ml | 产品价格： | ￥702.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 25ml | 产品价格： | ￥11700.0 |
商品属性：
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG) | BJ-PJ6584 | 1ml | 702 |
| RAPA3G Probe qPCR MasterMix(with UDG) | BJ-PJ6584 | 25ml | 11700 |
产品介绍：
RAPA3G Probe qPCR MasterMix 将热启动 RAPA3GDNA 聚合酶、反应 Buffer、dNTP 染料等试剂预混在一起，是一种 2×浓度的单组分预混试剂。该制品不含有 ROX 校正染料，适用于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量 PCR机型。优化的反应缓冲液，使得该制品可用于单重及多重的探针法定量 PCR。制品中的 RAPA3G DNA 聚合酶为第三代 DNA 聚合酶，其具有最高的杂质耐受性，其对乙醇、胍盐、肝素、血清、植物多糖多酚具有极高的耐受性，因此可用于粗样品的直接定量 PCR 检测(Direct PCR)。该酶经化学法修饰，在 50℃以下 100%无活性，只有 95 度条件下加热 5min 后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性 PCR 扩增，极大的提高了 PCR 扩增特异性。由于 RAPA3G DNA 聚合酶对 dUTP 具有极强的识别能力，该制品中的 dTTP 核酸碱基完全被 dUTP 所取代，因此扩增产物均包含 dUTP，在配合热敏 UDG（该酶在 95℃热变性 5min 后不可逆失活，不影响后续 PCR 反应）的条件下能达到最佳的防污染能力。在 10e5 copies 污染物的测试条件下，Ct 推迟 15 个以上（污染去除能力>99.997%）。
储存：-20℃可保存 2 年。短期使用可放置 2-8℃，保存 3 个月。如出现白色沉淀溶解后使用，不影响反应性能。该试剂经 30 次冻融后性能无下降，因此不使用时请置于-20℃避光保存。
RAPA3G DNA 聚合酶对抑制物耐受性
SDS 0.01% Serum 2%
EtOH 5% Plasma Citrate 2%
Heparin 0.1IU/ml Gua SCN 0.25%
Hematin 30μM Trizol 0.5%
操作方法
1、按照如下组分配制 20 μl PCR 反应体系：
终浓度
2×RAPA3G Probe MasterMix(with UDG) 10 μl 1×
Primer F1 (20 μM) 0.1-0.4 μl 0.1-0.4 μM
Primer R1 (20 μM) 0.1-0.4 μl 0.1-0.4 μM
Probe1 (20 μM) 0.1-0.4 μl 0.1-0.4 μM
其它引物和探针 X
DNA 模板 0.5~2 μl
ddH2O Up to 20 μl
2. 进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：
Stage 1 25℃ 2 min 去污染
Stage 2 95℃ 5 min 热启动
Stage 3
40 循环
95℃ 5 s 变性
60℃ 30 s 收集信号 退火/延伸
注意：退火延伸温度可在 55-65℃调整
3. 在多数情况下，采用两步法程序可获得理想的扩增效果，在无法达到预期理想效果的情况下，也可采用三步法 PCR程序，程序如下：
Stage 1 25℃ 2 min 去污染
Stage 2 95℃ 5 min 热启动
Stage 3
40 循环
95℃ 5 s 变性
55℃ 10 s 退火
72℃ 30 s 收集信号 延伸
4. 反应结束后确认 Real-Time PCR 的扩增曲线和标准曲线。
注意：消化污染步骤中的温度设置可在 25-37℃之间均可，无显著差异，但高于 42℃以上的温度会导致热敏 UDG 消化能力急剧下降。
公司正在销售的产品：
| 有丝分裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)ELISA试剂盒 | MAPK14 ELISA Kit |
| 游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 | FFA ELISA Kit |
| 游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒 | FEP ELISA Kit |
| 游离血红蛋白(f-Hb)ELISA试剂盒 | f-Hb ELISA Kit |
| 游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA试剂盒 | Free-T3 ELISA Kit |
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| 游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒 | fPSA ELISA Kit |
| 游离甲状腺素(FT4)ELISA试剂盒 | FT4 ELISA Kit |
| 游离睾酮(F-TESTO)ELISA试剂盒 | F-TESTO ELISA Kit |
| 游离蛋白S(FP-S)ELISA试剂盒 | FP-S ELISA Kit |
| 游离雌三醇(FE3)ELISA试剂盒 | FE3 ELISA Kit |
| 游离β绒毛膜促性腺激素(f-βhCG)ELISA试剂盒 | f-βhCG ELISA Kit |
| 幽门螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA试剂盒 | Hp-IgG ELISA Kit |
| 幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)ELISA试剂盒 | Hp-IgM ELISA Kit |
| 幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA试剂盒 | HP-CagA-IgG ELISA Kit |
| 优球蛋白(EL)ELISA试剂盒 | EL ELISA Kit |
| 硬骨素(SOST)ELISA试剂盒 | SOST ELISA Kit |
| 印度刺猬因子(IHH)ELISA试剂盒 | IHH ELISA Kit |
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文献和实验。G. 反应体系的设置：A-G这五个步骤简单设置好，可以保存，修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料，默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面；也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料，所以选择“none”。设置好之后，就可以把配置好的PCR管放进仪器，点击RUN！Real-time qPCR数据分析1. Real-time qPCR常见参数基线
Real-time qPCR 手册——手把手教你从菜鸟到高手
尽量靠在上游引物； 长度 30-45 bp，Tm 比引物高至少 5 ℃； 5』端不要是 G，G 会有淬灭作用，影响定量 四、Real-time qPCR 操作过程 1. RNA 提取和反转录 在抽提 RNA 过程中任一环节的不正确操作都可能导致 RNA 酶的污染。由于 RNA 酶的活性很难完全抑制，预防其污染是十分必要的。在实际的操作中应遵循下面一些原则： 1. 全程佩戴一次性手套。皮肤经常带有细菌和霉菌，可能污染 RNA 的抽提并成为 RNA 酶的来源。培养良好
Real-time qPCR手册---手把手教你从菜鸟到高手
书上建议的程序。 G. 反应体系的设置： A-G这五个步骤简单设置好，可以保存，修改反应程序或者立刻进行反应。需要注意一点ABI仪器需要加ROX参比染料，默认的是ROX。有些公司是把ROX或者其他染料配制在MasteMix里面；也有的是单独分开。要根据不同公司的MasterMix进行这一个步骤的选择。BioTeke的MasterMix里没有参比染料，所以选择“none”。设置好之后，就可以把配置好的PCR管放进仪器，点击RUN！五、Real-time qPCR数据
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