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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
46
- 英文名:
GP5d
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| GP5d细胞 | T25瓶 | LZ-X8760 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| A7r5(大鼠胸大动脉平滑肌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 化孔雀绿肉汤 MM,RV Medium 250克 沙门氏菌的选择性增菌培养 |
| 人胚肺成纤维样细胞 英文名称: KMB | 双甲酮溶液NA |
| RES 大鼠胚胎皮肤成纤维样细胞 | 米曲霉 英文名; Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn 规格; 冻干粉 海德尔堡沙门氏菌 Salmonella heidelberg 冻干粉 37℃;18-24h;好氧 羊肚菌属 Morchella sp. 模式菌株 no 28℃;5-7天;好氧 |
| U-2 OS, 人骨肉瘤细胞 Human | 盐肉肉汤 (CM0094) Oxoid incubation media 盐肉肉汤 (CM0094) Oxoid |
| 人支气管成纤维细胞完全培养基 100mL | 培养基Campylobacter selective Nc |
| T24 人膀胱移行细胞癌细胞 | LaemmliLoadingBuffer,4x蛋白电泳上样缓冲液蛋白组学级微粘,暗蓝/暗紫色液体RTsigma |
| NC021 大白鼠肺成纤维样细胞 | 轻化 litxium hydridq 808 |
| 英文名称MouseMCP-1ELISAkit小鼠单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)规格:96T/48T | 嗜冷芽孢八叠球菌 英文名; Sporosarcina psychrophila 规格; 冻干粉 发根根瘤菌 Rhizobium rhizogenes 冻干粉 30℃;48-72h;好氧 鸭沙门氏菌 Salmonella anatum 模式菌株 no 37℃;18-24h;好氧 |
| 培养皿 胶原包被100mm 培养皿 5个/包,50个/盒 | Diwo7iumbetaglycerolphosphatepentahydrateβ甘油嶙酸钠五水物250克BR,% |
| HB611(人肝癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 固盐shēng huà shì jì容量:2~8°C50毫克 |
| HumanCompleme4,C4ELISA试剂盒人补体蛋白4(C4)ELISA试剂盒规格:96T/48T | 橙Acridine orange;Basic orange 3RN;Rhoduline orange;Euchrysine 3RXA;C.I.005 |
| 大鼠上皮细胞完全培养基 100mL | 蜗牛凝集素25克 |
| GP5d细胞HLCL 14C1 人类淋巴母细胞瘤细胞 1ml/T75 | LBBROTH,MILLER(LURIABERTANI)LB肉汤组织培养级500GRT |
| 冰冻切片罗丹宁(RHODANINE)铜染色试剂盒50次 | 琼脂基础250g/瓶用于选择性分离,每培养基中添加2支205cubationmedia琼脂基础250g/瓶用于选择性分离,每培养基中添加2支20518 |
| 猕猴皮肤细胞;MMS7 | 结晶紫中性红胆盐糖琼脂 VRBG Agar 250克 奶粉中坂崎杆菌的分离培养 |
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文献和实验首先要把0.25%的胰酶和培养液在37度水浴20~30分钟(预热)。从培养箱中拿出培养的细胞瓶(一般我是让它长到90%几再传代的),吸去培养液,可用PBS洗两遍。也可不洗。加入适量0.25%胰酶消化(试瓶子的大小而定,如250毫升的瓶子加1毫升就行了),让它都浸湿细胞就可以吸去了。等个三十秒就在手上拍打,不要太用劲。就可以看到细胞脱落了,再加入3毫升左右的培养液吹打(这时加的培养液不要太多,否则难吹打成单个细胞!),制成细胞悬液,再传至消毒的培养瓶中(我一般是1传三,三天后又可以传代了)再加
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HPV DNA Detection and Typing in Cervical Scrapes
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