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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
36
- 英文名:
CMK-86
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| CMK-86细胞 | T25瓶 | LZ-X8710 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| CNE1, 人鼻咽癌细胞系 | SCPB基础 Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 250克 副溶血弧菌的选择性增菌培养 |
| 人间充质干细胞-脂肪 Human | 伊红美蓝琼脂平板(9cm)弱选择性培养基、用于分离肠道致病菌,特别是大肠杆菌 |
| PIEC(猪髋动脉内皮细胞 ) 5×106cells/瓶×2 | 粪肠球菌 英文名; Enterococcus faecalis 规格; 冻干粉 白假丝酵母 Candida albicans 冻干粉 28℃;24-48h;好氧 马球菌 Staphylococcus equorum 模式菌株 no 37℃;18-24h;好氧 |
| Hep 3B2.1-7 人肝癌细胞 | A.C.E.BUFFER1X,TINTEDA.C.E. 测序缓冲液 (1X 带颜色)测序级淡粉色无混浊液体RTsigma |
| 人星形胶质细胞 | 8266氧锆ZIRCONYL nitnATE |
| SMC-1 人胸膜瘤细胞 1ml/T75 | 4(2基本基)3安基流脲 4(2MqTHYLPHqNYL)3THIOSqMICcRBcZIDq 6108 |
| CRT 神经胶质瘤细胞 | 3501,4二清基本;对本二甲;对酞;对二清基本1,iyenobenzene;pPhthalodinitnile;Terephthalonitnile;Terephthalic acid dinitnile;pBenzenedicarbonitnile |
| ELISAKitsAC人可溶性腺苷酸环化酶规格:48T/96T | 乙酸钙不动杆菌 英文名; Acinetobacter calcoaceticus 规格; 冻干粉 解藻弧菌 Vibrio alginolyticus (Miyamoto et al.) Sakazaki 冻干粉 37℃;24-48h;厌氧 野野村氏菌 Nonomuraea sp. 模式菌株 no 30℃,2-3天,好氧 |
| L形细胞推刮器 L形细胞推刮器 独立包装,500个/盒 | Elastase弹性硬朊酶5克BR,400u/mg |
| GH3 大鼠垂体瘤细胞 1ml/T75 | 酚酞/酚/酚麸酞/酚麸/3,3双(4基)1(3H)异苯并酮/Phenolphthalein IND, 25克 国产/进口 |
| ELISAKitG-CSF人粒细胞集落刺激因子规格:48T/96T | GUANINE鸟嘌呤超级白色至淡米白色结晶粉末RTsigma |
| 大鼠心肌细胞培养试剂盒 大鼠心肌细胞培养试剂盒 试剂盒 | 52441,2醌4磺酸钠;β醌4磺酸钠1,2Naphthoinoneone4sulfonic acid wo7ium salt;wo7ium 1,2naphthoinoneone4sulfonate;βNaphthoinoneone4sulfonic acid wo7ium salt;3,4Dixy7no3,4dioxo1 sulfonic acid wo7ium salt |
| CMK-86细胞293 人胚细胞 | 双料乳糖蛋白胨培养液(含小倒管)20支/包用于大肠菌群、大肠杆菌的测定 |
| 小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 | potewwium trifluoro(2fluorobipxenyl4yl)borate 06235 |
| 恒河猴皮肤细胞;RM-S1 | 甜菜碱盐酸盐shēng huà shì jì容量:RT25克 |
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文献和实验hxf_86 各位大侠,小弟请教一个问题哈~ 现在想寻求一方法,特异性的阻断细胞内一个蛋白(暂且叫这个蛋白叫B)的作用。 以下是一些背景: 1.蛋白B是从一个大蛋白(暂且叫作蛋白A)中水解下来的 2.B从A中水解下来是自然现象,水解下来以后呢,A和B都有活性的 3.现在想特异性的阻断B的活性,但是要求是不影响A的活性,所以不能用RNAi 4.如果是用抗体的话,请问抗体能进入细胞核吗? 谢谢各位大侠啦~
【求助】将报告基因质粒转染到癌细胞中,是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆?
lsdcfhyj 很感谢xdb86的回答,让我弄懂了一直困惑的问题,只是我说的挑选阳性克隆,是因为我需要建立一个含报告基因的稳定的细胞系,用于后续的研究。我还有个问题,在感受态细胞中扩增出质粒,那我如何知道提出的质粒的量呢?谢谢 xdb86 用核酸分析仪测定DNA含量(OD260,OD280),就代表质粒的量。 lsdcfhyj 谢谢了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫
因子,可以用来看看是否参与了该凋亡过程。 ningning86 可以用流式细胞仪检测AV-PI双染后的情况。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
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