- ￥1170
- 邦景
- BJ-PJ6611
- 国产
- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
29
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海邦景
- 保存条件：
2-8℃
- 规格：
1000U
商品属性：
| 产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
| Klenow Fragment(exo-) | BJ-PJ6611 | 1000U | 1170 |
描述：
描述：Klenow 片段（3´→5´ exo-）是 DNA 聚合酶 I 的 N 末端截短物，它保留了 DNA 聚合酶活性，但失去了 5´→3´ 核酸外切酶活性。该酶进一步经突变（D355A，E357A）去 除了其 3´→5´的核酸外切酶活性。因此该 DNA 聚合酶无任 何外切酶活性，仅包含了 DNA 聚合酶活性，广泛用于标记 探针制备、cDNA 第二条链的合成等建库试验。
单位定义
一个活力单位即在 37°C 条件下，30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。该酶保存液中含有 50%甘油。
10×Klenow Buffer: 500 mM Tris-HCl (pH 8.0 at 25 °C), 50mM MgCl2, 10 mM DTT. 该酶兼容 PCR Buffer 和内切酶Buffer。
应用：
（1）用随机引物制备探针
（2）随机引物法标记
（3）cDNA 第二条链的合成
（4）该酶不能用于产物平端不齐失活：75°C，20min 失活。
储存：-20℃可保存 3 年。
随机引物生物素标记反应
1. 按以下组分配制反应液
10×Klenow Buffer 5 μl
模板 DNA 0.1~2 μg
dATP dCTP dGTP (2 mM each) 0.5 μl
Biotin-dUTP or dATP(2 mM) 0.5 μl
random hexamer(125 μM) 10 μl
ddH2O Up to 50 ul
95°C 5min 冰上放置 5min。
2. 聚合反应
加入 0.5 μl Klenow Fragment(exo-)，混合均匀。37°C 反应 15min，75°C 20min 失活。
| 人反应蛋白7A域 | 肿瘤抑制基因ABI2/精氨酸酪氨酸蛋白激酶结合蛋白抗体 |
| 人泛连接蛋白1 | ADP核糖基化因子样11抗体 |
| 人泛素A52残留核糖体蛋白融合产物1 | ARM重复X连锁蛋白ARMCX3抗体 |
| 人泛素C末端水解酶L1 | ARM重复X连锁蛋白ARMCX1抗体 |
| 人非受体型蛋白酪氨酸激酶 | ARM重复X连锁蛋白ARMCX2抗体 |
| 人非酰基化Ghrelin | 自噬相关蛋白10抗体 |
| 人肥大细胞羧肽酶 | 酰基辅酶A结合结构域蛋白6抗体 |
| 人肥素 | 氨基酰化酶1抗体 |
| 人肺癌抗原 | 脂肪甘油三酯脂酶抗体 |
| 人肺表面活性物质相关蛋白A2 | 磷酸化腺苷单磷酸活化蛋白激酶α1抗体 |
| 人酚氧化酶 | 双调蛋白（结肠直肠细胞源性生长因子）抗体 |
| 人粉尘螨特异性IgE抗体 | 磷酸化水通道蛋白2抗体 |
| 人父系表达基因10 | 粘附相关激酶抗体 |
| 人附睾分泌蛋白4 | 磷酸化粘附相关激酶抗体 |
| 人富含半胱氨酸型酸性蛋白 | 磷酸化蛋白激酶B抗体 |
| 人钙泵 | 磷酸化水通道蛋白2抗体 |
| 人钙调素；钙调蛋白 | 磷酸化APP淀粉样肽前体蛋白抗体 |
| 人钙调素依赖性蛋白激酶2 | 磷酸化蛋白激酶B抗体 |
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文献和实验Radiolabeling of DNA with the Klenow Fragment of DNA Polymerase
The Klenow fragment of DNA polymerase I is a proteolytic fragment obtained by the treatment of DNA polymerase I with subtilisin. The fragment still has the polymerase and 3′–5′ exonuclease activity, but lacks the 5′–3′ exonuclease activity
Dideoxy Sequencing Reactions Using Klenow Fragment DNA Polymerase 1
Historically, DNA sequencing by primed synthesis and chain terminators has been performed using the Klenow fragment of DNA polymerase 1(1 . This enzyme was derived from E. coli . DNA Pol I which, in addition to polymerase activity, has both 3′–
Mainly as a result of the booming interest in apoptosis and of the discovery of the occurrence of massive DNA breaks as a major feature of this type of cell death, during the past few years polymerase-based assays for detection of DNA breaks
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