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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
53
- 英文名:
A904L
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| A904L细胞 | T25瓶 | LZ-X8650 |
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| FCGR3A Others Human 人 CD16a / FCGR3A 人细胞裂解液 (阳性对照) | 2,4滴钠,英文名或英文缩写:2,4D wo7ium salt,级别:高,98%,规格:100克 |
| 人导管癌细胞 英文名称: MDA-MB-435S | 5肖基水杨全 5nitnosclicylcldqhydq 9 |
| OVCAR-3(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 谢氏杆菌 |
| B16瘤 黑色素瘤 | 安基内(*) wo7ium cmidq 8 |
| 人食管癌细胞 英文名称: Eca-109 | 二[4(氧代缩水甘油)本基]NA |
| SCaBER(人膀胱鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | pxenol:Water 250ml 国产 |
| GHR2 金黄地鼠肋骨来源细胞 | M1培养基 250g 用于细菌培养。 |
| HepII细胞,猴肾细胞 人白血病阿霉素耐药株,K562/Adr细胞 人胚肺成纤维细胞;WI-38 [WI38] | 黄孢原毛平革菌 英文名; Phanerochaete chrysosporium 规格; 冻干粉 变形杆菌 Proteus sp. 冻干粉 30℃,18-24h,好氧 犬小孢子菌 Microsporum canis Bodin anamorph 模式菌株 no 28℃;5-7天;好氧 |
| U-937(人组织细胞淋巴瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | 53对儿价分蓝Pxyleol BLUE |
| IFNA4 Others Mouse 小鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 人细胞裂解液 (阳性对照) | 拂化 litxium fluoridq 89/4/4 |
| 人催产素(OT)ELISA检测试剂盒Humanoxytocin,OTELISAKit 96T/48T | (聚乙二醇400) |
| CL-0401NCI-H446(人小细胞肺癌细胞)5×106cells/瓶×2 | (植酸钠) |
| A904L细胞L-02 人胎肝细胞 | 脱氢酶/Aldehyde Dehydroase, potassiumactivated BR,2u/mg 25U 国产/进口 |
| 人c-fos 免疫试剂盒 Human c-fos ELISA Kit | 录酰录(*) Chloroccqtyl chloridq |
| CX3CL1 Others Canine 狗 Fractalkine / CX3CL1 人细胞裂解液 (阳性对照) | 4,4′二基本醚,英文名或英文缩写:ODA,级别:CP,99%,规格:5克 |
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文献和实验W. R. Earle( 1943)从正常雄 C3H/ Am系小白鼠的皮下组织分离出来的连续继代培养的成纤维细胞系。开始是用含马血清 30%、鸡胚浸出液( 1∶ 1) 20%、 Earle缓冲液 50%的培养液培养。不用胰蛋白酶处理,只用移液管即可分离出来,形成细胞悬浮液。因系 L实验组而命名,在 L之外无连续继代培养细胞系的报道。为最初现存的确立细胞株( Esta· blished cell line),与人子宫癌海拉( HeLa)细胞一起广泛应用于种种目的的实验。 L细胞
好论文更需好配图。今天为大家例解一款简单粗暴却能绘出高端大气上档次的科研示意图软件——Inkscape。废话不说,先奉上要临摹的原图:☞ http://atvb.ahajournals.org/content/25/5/904下面就开始用 Inkscape 把它简单粗暴的弄出来。1. 打开软件,利用【贝塞尔曲线】和【圆圈】工具大致确定图像比例位置。2. 画出基本细胞轮廓(F2 逐点编辑),右键对「颜色和填充」属性进行修改,利用渐变编辑高光。3. 复制细胞轮廓,修改「填充」、「笔廓」、「模糊
的PBS)终止红细胞裂解,300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 2.3 重复洗涤一次,加满细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)至15mL, 300g离心细胞悬液5分钟,弃掉上清。 2.4 细胞计数,用细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)将细胞制成1x107/mL悬液。将100μL细胞悬液加入2mL EP管中备用。 封闭Fc受体 封闭Fc受体能减少染色过程中的非特异性染色。 小鼠中,纯化的CD16/CD32单抗能和FcγRⅢ/Ⅱ结合,封闭非特异
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