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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
52
- 英文名:
NCI-H358
- 生长状态:
贴壁生长
- 器官来源:
细支气管及肺泡癌;非小细胞肺癌;肺;细支气管;肺泡
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮样
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H358细胞 | T25瓶 | LZ-X968359 |
来源:细支气管及肺泡癌;非小细胞肺癌;肺;细支气管;肺泡
形态:上皮细胞样,贴壁生长
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk | 邻典本晴 2Ioqnzonitnilq 464 |
| 人肺腺癌细胞 英文名称: H1299 | 麦芽糖醇25克 |
| Ca SKi 人细胞 1ml/T75 | 华美链霉菌 |
| AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞 | Dicyclohexylphthalate邻酞酸二酯10克AR,99.5% |
| 人膀胱移行细胞癌 英文名称: J82 | 葡聚糖T5U |
| GP-S2 豚鼠皮质细胞 1ml/T75 | CBZD谷酸25克 |
| RabbitS1 家兔皮肤成纤维样细胞 | 霍乱双糖铁琼脂(KIA)250g用于的生化试验(SN标准) |
| TSPAN7 Others Human 人 TALLA-1 / TSPAN7 人细胞裂解液 (阳性对照) | PAO1铜绿假单胞菌 英文名; PAO1 Pseudomonas aeruginosa 规格; 冻干粉 克鲁斯假丝酵母 Candida krusei 冻干粉 30℃;24-48h;好氧; 厌氧消化链球菌 Peptostreptococcus anaerobius 模式菌株 yes 37℃;24-48h;厌氧 |
| U-87 MG(人神经胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | LIGHTGREENSFYELLOWISH亮绿高级深紫红色精细粉末RTsigma |
| 人绒毛膜间充质基质细胞 | 二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 6618 25G 通用试剂 |
| 小鼠Ⅹ型胶原(COL10)ELISA试剂盒 ,英文名: COL10 ELISA Kit | FLUORESCENTSPRINTGEL10%荧光SPRINT NEXT 胶, 10%蛋白组学级100mlRT |
| 草鱼肾细胞;GIK | 蜗牛凝集素shēng huà shì jì容量:25克 |
| NCI-H358细胞HEF 人食道组织来源细胞 | 聚亚安 50% in water POLYqTHYLqNqIMINq, BRcNCHqD 906 |
| 大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA检测试剂盒RatcoagulationfactorⅢ,FⅢELISAKit 96T/48T | N乙酰Lshēng huà shì jì容量:25克 |
| PC-12(高分化),PC12,大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤分化细胞株(高分化) | 邻本加醋 2Bromobqnzoic ccid 88623 |
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文献和实验都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
PNAS:RAS 抑制剂又添一员,新型蛋白模拟物或为癌症治疗
的细胞靶点Ras 蛋白由 150 多个成员组成,包括 Ras、Rho、Rab、Arf 和 Ran 亚家族。预计 Ras-Sos 复合物可能有多种组合模式,比如 Rab-Sos、Ran-Sos、Ras、Sos 等,目前尚无法知道 Sos 可能与哪些 Ras 家族成员结合。为了确定 CHDSos-5 的结合部位,研究团队对 H358 肺癌细胞进行荧光标记,然后通过基于蛋白质组学方法来富集相互作用因子及特征。研究团队共鉴定出 143 个蛋白质靶点:K-Ras、Ran 和几种 Ras 相关蛋白(RAB
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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