NCI-H2126 人肺癌细胞

NCI-H2126 人肺癌细胞

产品编号：CL-568h

细胞介绍

人肺癌细胞，腺癌，非小细胞肺癌，来源于胸腔积液转移灶.。

细胞特性

来源：人，男性，65 岁 肺

形态：上皮样   贴壁生长

含量：>1x10⁶cells

规格：T25瓶或者1mL冻存管包装

用途：仅供科研使用

细胞运输、保存及注意事项

	复苏细胞	冻存细胞
包装	充液的T25细胞培养瓶	1mL冻存管
运输条件	常温	干冰
保存方式	75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒温细胞培养箱	-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏
注意事项	①　收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁，将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们； ②　请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照，10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据； ③　贴壁细胞：细胞在37℃培养箱中放置2-3h，显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况，有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下，可去除培养瓶中灌液培养基（若有未贴壁的细胞需要离心回收，重悬打入到原培养瓶中）,加入新配制的完全培养基6-8mL，放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞进行传代处理。传代过程中，若因运输振动脱落的细胞需要离心回收； ④　运输用的培养基（灌液培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶 1：2传代。

培养基及培养冻存条件准备：

完全培养基	1640培养基+优质胎牛血清，10%+2mM L-谷氨酰胺+1mM丙，酮酸钠+双抗，1%
培养条件	气相：空气，95%；二氧化碳，5%；温度：37℃；培养箱湿度为70%-80%
冻存液	90%血清 + 10%DMSO，现用现配

 

 

细胞复苏、传代、冻存操作

（一）细胞复苏

①　新制 100mm 平皿 1个，含 12mL 上述培养液；

②　冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏；

③　用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；

④　放入（37℃，5%CO2）培养箱中，过夜换液，2-4天长满。

注意：建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩，避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。

（二）细胞传代

将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入2mL（/100mm皿/T25瓶）胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA），在显微镜下观察，期间禁止摇晃培养皿，细胞刚有脱落时，吸除大部分胰酶，留约0.5mL，移至培养箱消化，约1min取出。传代用6mL培养液终止消化，轻轻吹打均匀细胞，后可1:2传代。

（三）细胞冻存:

冻存则用3mL冻存液（90% FBS+ 10% DMSO）终止消化，吹打均匀，分为3支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。

注意事项

所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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