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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
NCI.H522,H522,H-522,NCI-522,NCI522,NCIH522
- 库存:
999
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
上皮细胞样,多角形,边缘不规则
- 运输方式:
常温/干冰
- 生长状态:
单层贴壁生长,有空泡
- 规格:
1×10⁶cells
NCI-H522 人非小细胞肺癌腺癌细胞
产品编号:CL-538h
细胞介绍
该细胞系是由A.F. Gazdar、H.K. Oie、J.D. Minna及其同事从一名58岁白色男性吸烟肺癌患者治疗前获得的。 这是一种亚三倍体人类细胞系,其模态染色体数出现在 68% 的计数细胞中。多倍体细胞发生率为 3.0%;所有细胞共有 11 条标记染色体,其中两条是配对的。标记包括:der(6)(q13)、t(7p17q)、del(10)(p11.23)、配对 der(7)t(7;?17)(p22;?q21.1) 和 der( 16)t(16;?)(q24;?) 和其他六个;正常 Y、N13、N15 和 N16 不存在;X染色体大多是成对的。这些细胞携带 TP53 基因密码子 191 的突变。细胞不能合成肽神经调节蛋白 B (NMB) 或胃泌素释放肽 (GRP)。细胞对角蛋白和波形蛋白染色呈阳性,但对神经丝三联体蛋白呈阴性。
细胞特性
来源:肺 腺癌;非小细胞肺癌;第二阶段
形态:上皮细胞样,多角形,边缘不规则,单层贴壁生长,有空泡
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
用途:仅供科研使用
细胞运输、保存及注意事项
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复苏细胞 |
冻存细胞 | |
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包装 |
充液的T25细胞培养瓶 |
1mL冻存管 |
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运输条件 |
常温 |
干冰 |
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保存方式 |
75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒温细胞培养箱 |
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
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注意事项 |
① 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们; ② 请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照,10X和20X各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据; ③ 半贴细胞或贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收; ④ 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶 1:2传代。 | |
培养基及培养冻存条件准备
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完全培养基 |
1640 培养基 + 优质胎牛血清 10% + 双抗 1% |
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培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃;培养箱湿度为70%-80% |
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冻存液 |
90%血清 + 10%DMSO,现用现配 |
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注意事项 |
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细胞复苏、传代、冻存操作
(一)冻存细胞的复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4~6mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm/min离心3~5min,弃去上清液。加入1mL完全培养基重悬细胞后,均匀铺于含6~8mL完全培养基的培养瓶(或皿)中,置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况。
注意:建议复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩,避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸造成人员伤害。
(二)细胞传代(建议以同等底面积的培养瓶/皿按照1:2比例传代)
① 待细胞密度达到70%~90%时,即可进行传代培养。
② 该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,该细胞用细胞刮铲替代胰酶来对细胞进行处理。用无菌细胞刮铲刮拭细胞附着培养表面将细胞刮落,收集细胞后离心去上清,重悬后接种到新的装有新鲜培养液的培养瓶内。收货后第一次传代1:2进行,后续可以根据实际的情况以1:2~1:4的比例进行传代
(三)细胞冻存
① 细胞冻存时,步骤同细胞传代的①~④,细胞计数后,加入配制好的细胞冻存液,重悬细胞,按照1×106 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
② 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项:
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
| CL-119h | MIA-PACA-2,MIAPACA2,人胰腺癌细胞 |
| CL-120h | PANC-1,PANC1,人胰腺癌细胞 |
| CL-121h | PATU8988t 人胰腺癌细胞 |
| CL-122h | SW1990, SW-1990, 人胰腺癌细胞 |
| CL-125h | Bxpc-3,Bxpc3,人原位胰腺腺癌细胞 |
| CL-127h | A2780 人卵巢癌细胞 |
| CL-128h | Caov-3,Caov3,人卵巢腺癌细胞 |
| CL-131h | SK-OV-3,SKOV3,人卵巢癌细胞 |
| CL-132h | CoC1 人卵巢癌细胞 |
| CL-134h | OVCAR-3 人卵巢腺癌细胞 |
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文献和实验Zhao D, Zhao H, He Y, et al. BMSC reduces ROS and inflammation levels by inhibiting TLR4/MYD88/NF-κB signaling axis to alleviate dry eye[J]. 2023.
涂片中腺癌(adenocarcinoma)分为分化较好的和分化差两种亚型。 1.分化较好的腺癌细胞:癌细胞体积较大,呈圆形、卵圆形、成排脱落者可呈不规则的柱状。胞质丰富略嗜碱染色,。胞质内可见粘液空泡,呈透明的空泡状,有的空泡很大,核被挤压在一边呈半月状,称为印戒细胞。医学教育|网搜集整理有时在胞质内见到圆形细胞围腺样结构。癌细胞核为圆形或卵圆形、略畸形,染色质丰富,略深染,呈粗块或粗网状,核边不规则增进取,常见1-2个增大核仁直径是可达3-5μm.胞质核常偏于癌细胞的一侧
都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
丁香园网友kj7156084的培养方法: 本室的PC-3来自上海细胞生物所,种是ATCC的。 以10%FBS+1640或F12培养,0.25%胰酶消化。塑料瓶或玻璃瓶都可以,当然,前者效果较好。复苏时最好用塑料瓶。 5-7天传一次(1:2),2-3天换一次液。尽量高密度传,因为PC-3细胞喜欢扎堆长,如果过了两三天细胞长得不均匀,可以消化离心一下。 传代后一到两天不要动它,要有耐心。 人前列腺癌细胞PC-3(高密
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