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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
OVCAR 8,NIH:OVCAR-8,OVCAR8,Ovcar8,OVCAR.8,OVCA8
- 库存:
999
- 供应商:
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
见详情介绍
- 细胞类型:
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- 品系:
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- 组织来源:
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- 相关疾病:
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- 物种来源:
人
- 免疫类型:
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- 细胞形态:
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- 是否是肿瘤细胞:
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- 器官来源:
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- 运输方式:
常温/干冰
- 年限:
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- 生长状态:
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- 规格:
1×10⁶cells
OVCAR-8人卵巢腺癌细胞
产品编号:CL-520h
细胞特性
来源:卵巢
形态:贴壁生长,上皮样
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
用途:仅供科研使用
细胞运输、保存及注意事项
复苏细胞 |
冻存细胞 |
|
包装 |
充液的T25细胞培养瓶 |
1mL冻存管 |
运输条件 |
常温 |
干冰 |
保存方式 |
75%酒精消毒瓶壁,置于37℃恒温细胞培养箱 |
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮/立即复苏 |
注意事项 |
① 收到细胞后,请及时核对培养瓶上标注的细胞名称是否与订购的细胞名称一致以及培养瓶是否有破损或漏液等异常情况; ② 75%酒精棉球擦拭 T25 细胞培养瓶外部; ③ 显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照保存(40x,100x,200x 各一张)前三天照片为重要售后依据,不提供照片默认收到状态良好; ④ 不要打开培养瓶盖,将细胞放入 37 度培养箱中静置 3-4 小时后再做处理,以稳定细胞状态; ⑤ 收到细胞后,及时查看说明书是贴壁细胞还是悬浮细胞形态,并按常规贴壁或悬浮细胞的传代方法操作。 |
|
培养基及培养冻存条件准备:
完全培养基 |
1640 + 10%FBS |
培养条件 |
气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃;培养箱湿度为70%-80% |
细胞复苏、传代、冻存操作
(一)冻存细胞的复苏
① 从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用 75%的酒精擦拭冻存管外壁;
② 将冻存管中的细胞移至含 5ml 完全培养基的 15ml 离心管中,1000rpm 离心5min;
③ 弃上清,沉淀用 5ml 完全培养基重悬,接种 T25 培养瓶,于 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养。第二天换用新鲜完全培养基继续培养。
(二)细胞传代
① 细胞生长至覆盖培养瓶的 80%面积时,弃 T25 培养瓶中的培养液,用PBS 清洗细胞一次;
② 添加 0.25%胰蛋白酶消化液约 1ml 至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入 5ml 完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml 离心管中,1000rpm 离心 5min;
③ 弃上清,沉淀细胞用 1-2ml 完全培养基重悬,然后按 1:2 比例进行分瓶传代(两个T25),补充新的完全培养基至 5-8ml/瓶,最后放入 37℃,5%CO2 细胞培养箱中培养。
(三)细胞冻存
① 细胞冻存时,细胞计数后加入配制好的细胞冻存液,重悬细胞,按照1×106 ~ 1×107个细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
② 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80℃冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项:
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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