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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
RLE-6TN
- 库存:
99
- 物种来源:
大鼠
- 细胞形态:
Ⅱ型肺泡细胞,上皮细胞样
- 运输方式:
常温/干冰
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1×10⁶cells
RLE-6TN 大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞
产品编号:CL-069r
一、细胞简介
RLE-6TN(大鼠肺上皮 T 抗原阴性)细胞系来源于使用链霉蛋白酶溶液进行气道灌注从 56 天大的雄性 F344 大鼠中分离的肺泡 II 型细胞。SV40-T 抗原的表达通过核免疫染色和 PCR 为阴性,表明这些细胞是通过自发永生化获得的。
该细胞系表现出肺泡 II 型细胞的特征,例如含脂质包涵体(膦 3R 染色和电子显微镜检查)和细胞角蛋白 8 和 19 的表达;细胞不表达碱性磷酸酶活性。据报道,RLE-6TN 细胞表达的几种趋化细胞因子与肺泡 II 型细胞的原代培养物相似。在裸鼠中不会致瘤。
二、细胞特性
来源:褐家鼠,肺
形态:Ⅱ型肺泡细胞,上皮细胞样,贴壁生长
含量:>1x10⁶cells
规格:T25瓶x1(常温运输)/ 含有1mL细胞悬液的冻存管x2(干冰运输)
用途:本产品仅供实验室研究使用,不可用于动物或人类治疗或诊断用途
三、完全培养基及冻存液配制
1) 该细胞完全培养基为:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
2) 培养环境:37℃;95% Air,5% CO₂
3) 冻存液:推荐使用非程序无血清细胞冻存液(货号:RC-0102)
四、收货注意事项
1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液体溢出及细胞有污染,冻存细胞若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落,请拍照后及时与我们联系。
2) 75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
3) 对于贴壁生长的细胞:①静置后显微镜下观察细胞生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在运输过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。②若细胞汇合度未超过80%,可去除培养瓶中旧液(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新的完全培养基5mL,放入培养箱中继续培养(若培养瓶为密封瓶盖须拧松瓶盖)。③若细胞汇合度超过80%,请立即传代(若因运输振动脱落的细胞需要离心回收),首次传代,建议 1:2 传代(两个T25)。
细胞培养操作说明
一、细胞复苏
1. 将含有1mL细胞悬液的冻存管快速放入37℃水浴中,摇晃冻存管加速解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%酒精擦拭冻存管外壁。
2. 将冻存管内容物加入到含有5mL完全培养基的离心管中混合均匀,1000rpm离心5min。
3. 弃去上清液,补加 4-6mL 完全培养基后吹匀,接种于T25培养瓶中,放入培养箱中培养过夜。
4. 第二天换液并检查细胞密度。
注意:在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和佩戴防护面罩,避免冻存管爆炸造成人员伤害。
二、细胞传代:细胞密度达80%~90%,即可进行传代
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培养箱中消化2-3min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后,加 5mL 以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出至离心管中,1000rpm 离心 5-8min,弃去上清液,补加 1-2mL 完全培养基后吹匀。
4. 按5-6mL/瓶补加完全培养基,将细胞悬液按 1:2 ~ 1:3 的比例分到新的含 5-6 mL 完全培养基的培养皿中或者培养瓶中,放入培养箱中培养。
三、细胞冻存
收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。步骤如下:
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL。
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清,用细胞冻存液重悬细胞,按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到一个冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞放入-80℃冰箱中,24h后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项:
所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全柜内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
| CL-300h | A375人恶性黑色素瘤细胞 |
| CL-301h | WERI-RB-1,WERIRB1,人视网膜神经胶质瘤细胞 |
| CL-303h | SW-13,SW13,人肾上腺皮质癌细胞 |
| CL-306h | AsPC-1,AsPC1,人转移胰腺腺癌细胞 |
| CL-307h | SBC-2,SBC2,人小细胞肺癌 |
| CL-308h | changliver人张氏肝细胞 |
| CL-309h | PANC10.05人胰腺癌细胞 |
| CL-310h | calu-6,calu6,人退行性癌细胞 |
| CL-311h | 永生化人脑微血管内皮细胞 hCMEC/D3 |
| CL-312h | HCT-15/5FU 人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株 |
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文献和实验Lei J.-X., Nowbar S., Mariash C.N., Ingbar D.H.
Thyroid hormone stimulates Na-K-ATPase activity and its plasma membrane insertion in rat alveolar epithelial cells.
Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol. 285:L762-L772(2003)
细胞表面,继而被吞噬裂解;靶细胞表面所结合的抗体与K细胞(见免疫活性细胞)表面的受体特异性结合,使K细胞活化,破坏靶细胞。根据其抗原来源不同,可将Ⅱ型变态反应性疾病分为两大类:一是抗原是机体自身,如临床上常见的输血反应、新生儿溶血症、自身免疫性溶血性贫血、肺-肾综合症等。二是抗原来自机体以外,如临床上多见的由药物半抗原等引起的粒细胞减少症、溶血性贫血、血小板减少性紫癜等。
参与该型反应。该型反应中的靶细胞主要是血细胞和某些组织成分。 二、组织损伤机制 Ⅱ型超敏反应中最常见的形式是由直接针对细胞或组织上的抗原并能结合补体的IgG或IgM类抗体所引起。细胞表面抗原与相应抗体结合导致细胞崩溃死亡、组织损伤或功能异常。参与Ⅱ型超敏反应的抗原、抗体及组织损伤机制分述如下: (一)抗原 Ⅱ型反应中的靶细胞主要是血液细胞,白细胞、红细胞和血小板均成为反应的攻击目标。某些组织特别是肺基底膜和肾小球毛细血管基底膜也是该型反应中的常见抗原。机体产生抗细胞
佚名 Ⅱ型变态反应又名细胞毒性抗体反应,是由抗体与靶细胞表面的抗原相结合而介导。抗原可以是细胞膜自身成分,也可以是吸附在细胞表面的外源性抗原或半抗原,可通过不同的机制而引起细胞损害。 1.补体介导的细胞毒反应(complement mediated cytotoxicity,CMC) 特异性抗体(IgM或IgG)与细胞表面的抗原相结合
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