- ￥8580
- SAIOS(赛奥斯)
- 中国武汉
- PC-243h
- 2025年11月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 供应商：
武汉赛奥斯生物科技有限公司
- 物种来源：
人
- 细胞形态：
成纤维样细胞
- 运输方式：
常温/干冰
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
5×10⁵cells
细胞复苏
1) 将恒温水浴锅中的水预热到37℃；
2) 准备一支15mL离心管，加入5mL含10%FBS的完全培养基，放入37℃水浴锅中预热；
3) 戴上护目镜，厚毛线手套后，从液氮罐中取出要复苏的细胞，尽快转入37℃恒温水浴锅中复温晃动冻存管以提高复温速率；
4) 将融化了的冻存管中的细胞吸入事先准备的离心管中，混匀后，1000rpm离心5min；
5) 准备一个T-25培养瓶，写上细胞名称、日期，再加入4mL完全培养基；
6) 离心完成后弃去上清，用1mL完全培养基重悬细胞，后转入T-25细胞培养瓶中，混匀后转入37℃，5%CO₂培养箱中静置培养。
注意：从液氮中取出细胞冻存管时，若冻存管内有液氮进入，需拧松冻存管，排出内部残留的液氮，之后拧紧冻存管，置于干冰上，然后放入37℃水浴中，避免温差太大造成液氮快速气化而爆炸。
细胞传代（建议使用Ｔ-25培养瓶1:2传代）
1) 当细胞汇合度达到85%以上时，可进行传代。
2) 在生物安全柜内，打开培养瓶瓶口，收集瓶内的培养基；
3) 向培养瓶内加入3mL无菌的1X PBS 后，水平放置培养瓶，使PBS能够浸润到培养瓶底面上所有的面积，吸弃PBS；
4) 向瓶内加入消化液1mL，浸润底面后放入37℃，CO₂培养箱中孵育1~2min；
5) 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起，若全部消化下来则直接向培养瓶内加入2mL含10%FBS的完全培养基，将悬液吸入15mL离心管；
注：如还有部分细胞未消化下来，可采用分步消化：
① 准备一个无菌的15mL离心管，加入2mL含10%FBS的完全培养基；
② 将消化下来的细胞吸入①中的离心管内中和（避免吹打）；
③ 向之前消化的培养瓶中加入1mL胰酶继续消化2min左右，轻拍培养瓶，95%左右细胞脱落后加入2mL含10%FBS的完全培养基中和，中和后的细胞悬液移入①中的离心管内。
6) 1000rpm离心5min；
7) 准备两个新的T-25培养瓶，各加入4mL完全培养基。
8) 离心完成后，弃上清，用2mL完全培养基重悬离心细胞，将重悬后的细胞转入2个T-25培养瓶，每个培养瓶各1mL；
9) 水平放置培养瓶，震荡混匀后，将培养瓶置于37℃，5% CO₂培养箱中静置培养。
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文献和实验Zhao D, Zhao H, He Y, et al. BMSC reduces ROS and inflammation levels by inhibiting TLR4/MYD88/NF-κB signaling axis to alleviate dry eye[J]. 2023.
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