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麦格生物
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江苏麦格生物科技有限公司是集研发、生产、销售、客户服务为一体的生物类高新技术企业;长期致力于为广大客户提供试,耗材、检测为一体的整体解决方案。

细胞培养类、动物血制品、病理染色液、蛋白与免疫、常规溶液等。本公司产品因可靠而稳定的质量和完善的售后服务确立了良好的企业形象。
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文献和实验的时候出问题了 细胞估计已经破裂 固定时候应该缓慢添加固定液 有的时候固定液就是用PBS和无水乙醇配置的。 Fasta921 我做的步骤:接种适当浓度细胞于培养皿中,培养过夜后,经0.25%胰蛋白酶消化,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后离心,用70%(体积分数)预冷乙醇悬浮细胞于-20度固定过夜后,离心收集细胞,用PBS洗3次去除乙醇,细胞团重悬于PBS中,用20 μg/ml含RNaseA的碘化丙啶PI染色液避光染色30 min,经100目尼龙
(Sigma),加2×10(4)—5×10(4)细胞到抗体包被的PVDF包被板,在孵箱中培养10—15小时。对于其它刺激物孵育时间可能不同,根据细胞因子产生细胞的密度,优化条件。 ●试剂准备 ● 检测抗体 用0.55ml蒸馏水溶解冻干抗体,轻轻混匀溶液并等到所有冻干抗体溶解。 ● 抗生物素蛋白链霉素-碱性磷酸酶 用含1%BSA的PBS稀释(1/1000) ● 碱性磷酸盐缓冲液(10×浓缩液) 1L溶液:80g NaCL;2g KH2PO4; 14.4g Na2HPO42H2O; 2g
图 直接法简便而快速,适合检测浓度较高的蛋白质抗原,如肾脏、皮肤抗原的检查。在临床上也常用于细菌、螺旋体、原虫及真菌的检测。该法基本染色步骤如下: 1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价的荧光标记特异性抗体,置人湿盒内,室温或37~C染色30分钟。 2.洗片 洗去存留的荧光抗体,将切片浸入pH 7.2~7.4的PBS中振荡或摇动洗涤2次,每次5分钟,再用蒸馏水洗1分钟,除去盐结晶。 3.封固和观察 用50%甘油缓冲液(pH 9.0~9.5的0.
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