- ￥1000
- wksubio
- WS5060F
- 国内
- 2025年11月07日
12 年金牌会员
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Plant Fructose-1,6-Diphosphate (FBP) Enzyme Kit
- CAS号：
WS5060F
- 保质期：
3个月
- 供应商：
上海瓦兰生物
- 保存条件：
4℃
- 规格：
48T
本试剂盒仅供科研使用
植物果糖-1,6-二磷酸（酯）酶(Fructose 1,6-bisphosphatase，FBP)
试剂盒说明书
（货号：WS5060F 紫外分光法 48 样）
一、产品简介：
果糖-1,6 二磷酸酶又称果糖 1,6 二磷酸酯酶（FBP，EC 3.1.3.11），有两种 FBPase 存在于
光合细胞中。胞质型 FBP 主要存在于细胞质，参与蔗糖合成和糖异生途径；叶绿体型 FBP
存在于叶绿体中，它在二氧化碳同化途径中发挥调节作用。
FBP 催化 1,6 二磷酸果糖和水生成 6 磷酸果糖和无机磷，接着与酶促复合物相互作用，
伴随着 NADPH 的生成，通过检测 NADPH 在 340nm 处的增加速率，进而计算出 FBP 酶活
性大小。
二、试剂盒的组成和配制：
试剂名称
规格
保存要求
备注
提取液一
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
提取液二
液体 60mL×1 瓶
4℃保存
试剂一
粉剂 mg×1 支
4℃保存
用前甩几下或离心使试剂落入底
部，再加 2.1mL 蒸馏水溶解备用。
试剂二
粉剂 mg×1 支
-20℃保存
用前甩几下或离心使试剂落入底
部，再加 2.1mL 蒸馏水溶解备用。
试剂三
液体 30mL×1 瓶
4℃保存
试剂四
粉剂 mg×1 瓶
4℃保存
用前甩几下或离心使试剂落入底
部，再加 4.2mL 蒸馏水溶解备用。
三、所需的仪器和用品：
紫外分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、恒温水浴锅、台式离心机、可调式
移液器、研钵和蒸馏水。
四、果糖-1,6-二磷酸（酯）酶(FBP)活性检测：
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
验样本和试剂浪费！
1、样本制备：
① 总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液二进行冰浴匀浆，于4℃，13000rpm
离心5min，取上清液测定。
② 胞浆和叶绿体 FBP 酶的分离：
称取约0.2g样本，加入1mL提取液一，快速冰浴匀浆后于4℃，1600rpm离心5min，弃
沉淀，取上清再4℃，5000rpm离心15min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL
提取液二，强力涡旋震荡15s，置于冰上(或冰箱)孵育15min，在4℃，13000rpm离心5min，
取上清测定叶绿体中FBP酶活性。提示：整个叶绿体的提取过程须保持4℃低温环境。
建议测定总 FBP 酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的
FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
【注】：若增加样本量，可按照组织质量（
g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取
2、上机检测：
① 紫外分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 340nm，设置温度 25℃，蒸馏水调零。
② 试剂解冻至室温（25℃）。
③ 在 1mL 石英比色皿中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
2
试剂名称（
μL）
测定管
样本
40
试剂一
40
试剂二
40
试剂三
500
轻轻混匀，室温（25℃）孵育 10min
试剂四
80
混匀，于 340nm 处测定，1min 时读取 A1，10min
后读取 A2，ΔA=A2-A1。
【注】若ΔA 在零附近徘徊，可以延长至 20min 后重新读取 A2，或则增加样本量 V1（如增
至 80μL，则试剂三相应减少），则改变后的反应时间 T 或样本量 V1 需重新代入计
算公司计算。
五、结果计算：
1、按样本蛋白蛋白浓度计算：
酶活定义：每毫克组织蛋白每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活性单位。
FBP(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(V1×Cpr) ÷T
=281.4×ΔA÷Cpr
2、按照样本鲜重计算：
酶活定义：每克组织每分钟催化产生 1nmol NADPH 定义为一个酶活力单位。
FBP(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(W×V1÷V)÷T
=281.4×ΔA÷W
V---加入提取液体积，1 mL；
V1---加入样本体积，0.04mL；
V2---反应体系总体积，7×10-4 L；
d---光径，1cm；
ε---NADPH 摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；
W---样本质量，g；
T---反应时间，10min；
Cpr---蛋白浓度（mg/mL），建议使用本公司的 BCA 蛋白含量测定试剂盒。
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
植物果糖-1,6-二磷酸(酯)酶(FBP)试剂盒
￥1000
