PEI-Chitosan 聚乙烯亚胺修饰壳聚糖 基因载体

PEI 转染法

材料： 质粒DNA 指数生长的真核细胞 PEI （聚乙烯亚胺） 1×HBS （pH7.4） 配方： PEI 储存液（100 μM）：称取125 mg PEI 粉末溶解于50 ml 1×HBS （pH7.4）中， 0.2 μm 滤膜过滤，储存于4℃备用。 1×HBS （pH7.4）： 将8.76 g NaCl 溶解于900 ml 超纯水，加入20 ml 1 M 的HEPES，调pH 值到7.4，定容至1 L，过滤（0.2 μm 滤膜）后储存于4℃备用。 方法

基因疗法简介

）、形成内体（endosome）、溶酶体融合和裂解等。内体中的pH为5.5，在pH为5～7的具有高缓冲力的阳离子高分子如聚乙烯亚胺（PEI）具有较高的转染率。近年来各种天然和合成的阳离子高分子用作基因传递系统[7],包括PEI[8]、聚酰胺�胺树形高分子（dendrimer） [9]、脱乙酰壳多糖（chitosan）[10]、明胶[11]、阳离子多肽[12]、阳离子聚酯[13]、阳离子聚磷酸酯[14]、聚乙烯基吡啶盐、聚（二甲氨基）乙基甲基丙烯酸酯等。� 另外一些两亲性高分子如聚乙

细胞转染技术原理及应用（瞬时转染和稳定转染）

糖苷法，磷酸钙法，电穿孔法，脂质体法各有利弊，其主要原理及应 用特点见下表： （各种转染方法的比较） 除上述传统方法外，近年来国际上推出了一些阳离子聚合物基因转染技术，以其适用宿主范围广，操作简便对 细胞毒性小，转染效率高受到研究者们的青睐。其中树枝状聚合物（Dendrimers）和聚乙烯亚胺（Polyethylenimine， PEI）的转染性能最佳，但树枝状聚合物的结构不易于进一步改性，且其合成工艺复杂。聚乙烯亚胺是一种具有较 高的阳离子电荷密度的有机大分子，每相隔二个碳个原子