- ￥8895 - 16425
- 翌圣生物（Yeasen）
- 41307ES
- 上海
- 2025年10月16日
企业认证
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- 详细信息
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
Vero Host Cell DNA Residue Detection Kit （2G）
- 保质期：
一年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
50T(41307ES50)/100T(41307ES60)
| 规格： | 50T(41307ES50) | 产品价格： | ￥8895.00 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 100T(41307ES60) | 产品价格： | ￥16425.00 |
产品简介
Vero宿主细胞DNA残留检测试剂盒是用于定量分析检测各种生物制品的中间品、半成品和成品中的Vero残留DNA含量的试剂盒。
本试剂盒采用探针法荧光定量PCR原理，可专一快速的检测Vero细胞的残留DNA，其最低检测限可以达到fg水平。该试剂盒可与本公司的磁珠法残留DNA样本前处理试剂盒(Cat#18461ES/18462ES)配套使用。
产品信息
| 货号 | 41307ES50 / 41307ES60 |
| 规格 | 50 T / 100 T |
组分信息
| 组分编号 | 组分名称 | 41307ES50 | 41307ES60 |
| 41307-A | Vero qPCR Mix | 0.75 mL | 1.5 mL |
| 41307-B | Vero Primer&Probe Mix | 200 μL | 400 μL |
| 41307-C | DNA Dilution Buffer | 1.8 mL×2管 | 1.8 mL×4管 |
| 41307-D | Vero DNA Control（30 ng/μL） | 25 μL | 50 μL |
| 41307-E | IC* | 50 μL | 100 μL |
*IC：Internal control，内部对照
储存条件
1. 所有组分均干冰运输，-25~-15℃保存，有效期2年。其中，41307-A和41307-B均需避光保存。
2. 收到货后，请检查共5个组分是否齐全，并立即放入对应的保存温度中储存。
注意事项
1. 本产品仅作科研用途。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 使用本试剂前请仔细阅读说明书，实验应规范操作，包括样本处理、反应体系的配制及加样。
4. 每个组分在使用前都应充分震荡混匀，低速离心。
适用机型
包含但不限于以下仪器：
Thermo Scientific：ABI 7500，ABI Quant Studio 5，ABI Step OnePlus；
Bio-Rad：CFX96 Optic Module；
上海宏石医疗科技：SLAN-96S。
使用说明
1. Vero DNA Control定量参考品的稀释和标准曲线的制备
用试剂盒中提供的DNA Dilution Buffer（DNA稀释液）将Vero DNA Control定量参考品进行梯度稀释*，稀释浓度依次为3 ng/μL，300 pg/μL，30 pg/μL，3 pg/μL，300 fg/μL，30 fg/μL，3 fg/μL。
具体操作如下：
1）将试剂盒中的Vero DNA Control定量参考品和DNA Dilution Buffer置于冰上融化，待完全融化后，轻微振荡混匀，低速离心10 sec。
2）取7支洁净的1.5 mL离心管，分别标记为Std0，Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6。
3）在标记为Std0的1.5 mL离心管中加90 μL DNA Dilution Buffer和10 μL Vero DNA Control定量参考品，Std0即稀释为3 ng/μL的浓度，振荡混匀后低速离心10 sec，该浓度可分装置于-20℃短期保存（不超过3个月）**，使用时避免反复冻融。
4）在Std1，Std2，Std3，Std4，Std5，Std6离心管中先分别加入90 μL DNA Dilution Buffer***，再进行梯度稀释****，具体稀释方法如下：
| 稀释管 | 稀释比例 | 终浓度 |
| Std1 | 10 μL Std0 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 300 pg/μL |
| Std2 | 10 μL Std1 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 30 pg/μL |
| Std3 | 10 μL Std2 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 3 pg/μL |
| Std4 | 10 μL Std3 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 300 fg/μL |
| Std5 | 10 μL Std4 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 30 fg/μL |
| Std6 | 10 μL Std5 + 90 μL DNA Dilution Buffer | 3 fg/μL |
表1 标准品梯度稀释
*每个浓度做3个复孔，该试剂可测试300 pg/μL~3 fg/μL线性范围。若需要，可适当扩大或缩小线性范围。
**为减少反复冻融次数和避免污染，建议初次使用时将DNA定量参考品分装储存于-20℃。
***已融化未使用的DNA稀释液可保存于2-8℃ 7天，若长时间不用，请放置于-20℃。
****为确保模板完全混匀，每个梯度稀释时需轻微震荡混匀约1 min。
2. 样本加标回收质控ERC的制备
根据需要设置ERC中的Vero DNA标准品浓度（以制备加30 pg Vero DNA量的ERC为例），具体操作如下：
1）取100 μL待测样本加入1.5 mL洁净的离心管中，再加入10 μL Std3，混匀，标记为ERC。
2）加标回收ERC和同批待测样本一起进行样本前处理，制备加标回收ERC纯化液。
3. 阴性抽提质控NCS的制备
根据实验设置阴性抽提质控NCS，具体操作如下：
1）取100 μL样本基质溶液（或DNA稀释液）加入1.5 mL洁净的离心管中，标记为NCS。
2）阴性质控NCS和同批待测样本一起进行样本前处理，制备成阴性质控NCS纯化液。
4. 无模板对照NTC的制备
根据实验设置无模板对照NTC，具体操作如下：
1）无模板对照NTC无需进行样本前处理，在qPCR法检测残留DNA含量阶段开始配置即可。
2）每管或孔中NTC样本为20 μL Mix混合液（即15 μL Vero qPCR Mix + 5μL Vero Primer&Probe Mix）+ 10 μL DNA Dilution Buffer，建议配置3个重复孔的量。
5. 反应体系
| 组分 | 体积(μL) |
| Vero qPCR Mix* | 15 |
| Vero Primer&Probe Mix | 4 |
| IC | 1 |
| DNA Template** | 10 |
| 总体积*** | 30 |
表2 标准品反应体系
*根据反应孔数计算本次所需Mix混合液总量：Mix混合液=（反应孔数+2）× (15+4+1) μL（含有2孔的损失量）。通常，每个样本做3个重复孔。
**反应孔数=（6个浓度梯度的标准曲线+1个无模板对照NTC+1个阴性抽提质控NCS+待测样TS个数+待测样本对应加标回收ERC个数）× 3。
NTC (No Template Control)：DNA Dilution Buffer
NCS (Negative Control Solution)：样本基质溶液或DNA Dilution Buffer进行样本前处理后，所得纯化液为NCS
TS (Test Sample)：待测样本
ERC (Extraction Recovery Control)：待测样本中加入如10 μL的3 pg/μL标准品DNA后进行样本前处理，所得纯化液为加标回收ERC
***加样完成密封好管子后，请低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，再震荡混匀5 sec以上，完全混匀反应液，再低速离心10 sec将管壁的液体离心收集至管底，如有气泡，需将气泡排尽。
下表为参考板位：
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| A | NTC | 待测样本TS1 | 待测样本TS1 | 待测样本TS1 | 标准曲线Std1 | 标准曲线Std1 | 标准曲线Std1 | |||||
| B | NTC | 待测样本TS2 | 待测样本TS2 | 待测样本TS2 | 标准曲线Std2 | 标准曲线Std2 | 标准曲线Std2 | |||||
| C | NTC | 待测样本TS3 | 待测样本TS3 | 待测样本TS3 |
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