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叶绿体色素(叶绿素a、b和类胡萝卜素)含量试剂盒

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  • ￥260
  • wksubio
  • WS3160F
  • 国内
  • 2025年07月21日
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    • 英文名：

      Chloroplast pigments (chlorophyll a, b, and carotenoids) content kit

    • CAS号：

      WS3160F

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    叶绿体色素含量测定试剂盒说明书
    (货号：WS3160F 分光法 48 样)
    一、产品简介：
    叶绿体中所含色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素 a 和叶绿素 b)和类胡萝卜素(包
    括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白复合体，其含量
    多少及其组成决定了植物对不同光的吸收、利用效率，常常作为研究光合生理的重要指标。
    根据叶绿体色素提取液对可见光谱的吸收，在 649nm 和 665nm 处测定叶绿素提取物的
    吸光值，在 470nm 处测定类胡萝卜素；然后利用经验公式计算出样品中叶绿素 a 含量、
    叶绿素 b 含量、叶绿素总含量及类胡萝卜素含量。
    二、试剂盒组分与配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    试剂一
    粉剂×1 瓶
    4℃保存
    乙醇（自备）
    600mL×1 瓶
    4℃保存
    抽提 Buffer 配制：（体积比）乙醇：蒸馏水=95:5
    三、所需的仪器和用品：
    可见分光光度计、天平、1 mL 玻璃比色皿（光径 1cm）、10mL 玻璃试管、锡箔纸、无
    水乙醇。
    四、叶绿体色素含量的测定：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实
    验样本和试剂浪费！
    1、样本制备
    （1）取新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉。
    （
    2）称约 0.1g 剪碎，用蒸馏水洗干净，然后加入 1mL 抽提 Buffer，少量试剂一（约 50mg），
    叶绿素对光敏感，务必在黑暗或弱光条件下充分研磨（难磨叶片可以添加少量石英砂助
    磨），然后转移至 10mL 玻璃试管。
    （
    3）用抽提 Buffer 冲洗研钵，将所有冲洗液及研钵中所有的绿色物质转入 10mL 玻璃试管，
    用抽提 Buffer 补充至 10mL，玻璃试管置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提 3h，观察试
    管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
    2、上机检测
    分别取 1mL 浸提液和 1mL 抽提 Buffer 于 1mL 玻璃比色皿(光径 1cm），记为测定管和
    空白管，分别于 665nm 和 649nm 和 470nm 处读取吸光值 A，△A 665=(A 测定-A 空白) 665，
    △A 649=(A 测定-A 空白) 649，△A 470=(A 测定-A 空白) 470。
    【注】：若吸光值 A 超过 1，待检测的浸提液用抽提 buffer 稀释，计算公式乘以稀释倍数。
    五、结果计算：
    叶绿素 a 含量（mg/g 鲜重）=Ca×
    W
    D
    V
    1000
    叶绿素 b 含量（mg/g 鲜重）=Cb×
    W
    D
    V
    1000
    叶绿素总含量（mg/g 鲜重）=CT×
    W
    D
    V
    1000
    类胡萝卜素含量（mg/g 鲜重）=Cc×
    W
    D
    V
    1000本试剂盒仅供科研使用
    Ca=13.95×△A665–6.88×△A649 (mg/L)；
    Cb=24.96×△A649–7.32×△A665(mg/L)；
    CT=6.63×△A665+18.08×△A649(mg/L)；
    Cc=(1000×△A470-2.05×Ca-114.8×Cb)÷245(mg/L)
    =(1000×△A470-2851.304×△A649+811.7385×△A665)÷245 (mg/L)；
    V---代表提取液体积，10mL；
    D---代表稀释倍数，未稀释即为 1；
    W---代表样本质量，g
    2

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