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原果胶(PP)含量试剂盒

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  • WS3070F
  • 国内
  • 2025年12月22日
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    • 英文名

      Raw Pectin (PP) Content Kit

    • CAS号

      WS3070F

    • 保质期

      3个月

    • 供应商

      上海瓦兰生物

    • 保存条件

      4℃

    • 规格

      48T

    本试剂盒仅供科研使用
    原果胶含量试剂盒说明书
    (货号:WS3070F 分光法 48 样)
    一、产品简介:
    果胶是构成细胞初生壁和中胶层的主要成分,主要由原果胶、果胶酸甲酯和果胶酸等
    形式广泛分布于植物果实、根茎和叶中。果胶和纤维素以及金属离子等物质相结合形成不
    溶于水的原果胶,他的存在使果实显得坚实、脆硬。
    本试剂盒先提取得到原果胶,采用咔*比色法测定原果胶含量。原果胶在稀酸中水解
    为可溶性果胶,并进一步转化为半乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔*进行缩合反应,生成紫
    红色物质,经光谱扫描该物质在 530nm 处有最大吸收峰,颜色深浅与果胶含量成正比,
    进而得原果胶含量。
    二、试剂盒组成和配制:
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 60 mL×1
    4℃保存
    试剂一
    液体 1.5mL×1
    4℃保存
    标准品
    粉剂 mg×1
    4℃保存
    若重新做标曲,则用到该试剂
    三、所需的仪器和用品:
    可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、水浴锅、可调式移液器、乙醇浓硫
    、研钵。
    四、原果胶含量测定:
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
    样本和试剂浪费!
    1、样本制备:
    1 0.1g 组织(烘干且过筛后的粉末组织可取 0.01g),加 1.5mL 80%乙醇,研磨匀
    浆,85℃水浴 10min(及时补充 80%乙醇至 1mL),取出流水冷却后,8000rpm25
    离心 10min,弃上清,留沉淀,
    2
    向沉淀中加入 1mL 80%乙醇,混匀,85℃水浴 10min(及时补充 80%乙醇至 1mL),
    取出流水冷却后,8000rpm25℃离心 10min,弃上清,留沉淀。
    ③ 再向沉淀中加入 1 mL 蒸馏水,混匀,50℃水浴 30min,流水冷却至室温,8000rpm25
    离心 10min,弃上清,留沉淀。
    ④ 向沉淀中加入 1mL 提取液,混匀,95℃水浴 60min,流水冷却至室温,8000rpm25
    离心 10min,取上清液待测。
    2、上机检测:
    ① 分光光度计预热 30min 以上,调节波长为 530nm,蒸馏水调零。
    ② 可取两个样本做适当梯度的稀释(如 4 倍,即 1 份上清液+3 份蒸馏水),确定
    适合本次实验的稀释倍数 D
    ③ 在 EP 管中依次加入:
    试剂名称
    µL
    测定管
    空白管
    (仅做一次)
    样本
    105
    蒸馏水
    105
    浓硫酸
    630
    630
    可用封口膜缠紧,85℃水浴 15min 后,本试剂盒仅供科研使用
    2
    流水冷却至室温。
    试剂一
    21
    21
    混匀,室温(25℃)暗处反应 30min(间隔 10min
    混匀一次),全部液体转移至 1mL 玻璃比色皿中,
    530nm 处读取吸光值 AA=A 测定-A 空白。
    【注】:1、浓硫酸必须是分析纯级别,且不能长期开口放置,否则影响显色结果。另外浓硫酸具有
    强腐蚀性,操作时需特别注意,85℃加热取出后冷却再打开盖子,以防液体飞溅烧伤。
    2、显色反应必须在暗处反应,否则颜色很快消失或者变淡,影响吸光值。
    3、若 A 测定管值大于 1.8,可用蒸馏水稀释样本即待检测上清液,则稀释倍数 D 需代入公
    式计算;或若 A 值再零附近可增加样本取样质量 W
    五、结果计算:
    1、标准曲线方程:y = 2.6619x-0.0141;,x 为标准品浓度(mg/mL),y A
    2、原果胶含量(mg /g 重量) =[(ΔA+0.0141) ÷2.6619×V1]÷ (W×V1÷V)×D
    =0.37×(ΔA+0.0141)÷W
    W---样本重量,g
    V---加入提取液体积,1mL
    V1---加入样本体积,0.105mL
    D---稀释倍数。
    附:标准曲线制作过程:
    1 制备标准品母液(0.5mg/mL):临用前向标准品中加入 2mL 蒸馏水(现配现用)。
    2 把母液用蒸馏水稀释成六个浓度梯度的标准品:00.10.20.30.40.5. mg/mL
    也可根据实际样本来调整标准品浓度。
    3 依据测定管的加样表操作,根据结果即可制作标准曲线。

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