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50次
一步法多片段无缝克隆预混试剂
One-step Seamless Cloning and Assembly Premix
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货号规格
goodMH201 50次
产品内容

产品简介
good与传统的克隆方法相比,无缝克隆技术基于基因重组原理,无需繁琐的酶切、连接步骤,以及末端补平等操作,通过插入片段与线性化载体末端同源序列(15~25 nt)的重组,可将DNA片段克隆至任意线性载体的任意位点,是一种简洁高效的DNA定向克隆技术。
good本产品作为新一代重组克隆试剂盒,一次反应即可完成单个至多个DNA片段的重组,最快仅需5min即可完成单片段重组,阳性率高达95%以上,此外,经过优化的反应体系,能够在一定程度上耐受未纯化PCR产物中含有的杂质。
注意事项
good1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
good2. 本产品仅限科研使用。
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文献和实验,扩增目标片段 扩增片段与线性化载体、组装预混酶混合反应 转化感受态细胞 · Step 1 · 如果载体上正好有合适插入目标片段的酶切位点,酶切载体使之线性化。为了降低单酶切载体不完全的几率,减少载体自连和提高筛选成功率,强烈建议双酶切——后面一个切点只要距离第一个切点 5 个碱基以上就行(主要是给两个酶留出结合空间)。如果没有合适的酶切位点,根据选定插入位点设计引物,用反向 PCR 来获得线性化载体。在多片段组装克隆的世界里,凡是酶切搞不定的,统统 PCR 引物设计搞定。简单粗暴有效。 ·
近来在zyh43所在的医院检验科做支原体检测中,遇到一些问题:用支原体(UU/MH)培养、药敏、定量检测试剂盒测得阳性的病人,用这种试剂盒测定的药敏中敏感的抗生素进行临床治疗,但是经过几个疗程的治疗,没有任何效果,支原体感染仍为阳性,因此对他的药敏检测结果产生怀疑,想用一种方法检测这种试剂盒的药敏是否可靠,但是苦于不知用什么方法进行检测最为科学,因此在这里向各位同仁请教一二,望各位大侠不吝指教,谢谢!!threengshaw认为有两种可能:1、体外药物敏感试验与体内药物对病原体的作用
1.营养肉汤培养基 牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克 NaCl 0.5克 水 100毫升 pH 7.0~7.2 在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl,加热溶化后,调节pH值至7.0~7.2。分装,加棉塞










