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- 国产/进口
- 2026年01月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系：
狗原代成骨细胞
- 细胞类型：
狗原代成骨细胞
- 肿瘤类型：
狗原代成骨细胞
- 供应商：
上海晅科生物科技有限公司
- 库存：
12
- 英文名：
/
- 生长状态：
长梭状，不规则细胞，贴壁培养
- 年限：
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式：
快递形式
- 器官来源：
狗原代成骨细胞
- 是否是肿瘤细胞：
/
- 细胞形态：
长梭状，不规则细胞，贴壁培养
- 免疫类型：
狗原代成骨细胞
- 物种来源：
狗原代成骨细胞
- 相关疾病：
狗原代成骨细胞
- 组织来源：
幼年实验动物的颅骨组织
- 规格：
5*10^5
细胞详述
成骨细胞是骨发生和骨形成的重要细胞，具有合成、分泌组成骨基质的胶原和糖蛋白的作用，并通过钙化基质形成骨组织。另外，成骨细胞在维持机体内环境的稳定，生理机制调节和骨代谢性疾病中亦发挥重要作用。
细胞特性：1)组织来源于幼年实验动物的颅骨组织。
2)细胞鉴定：碱性磷酸酶（ALP）化学染色。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：长梭状，不规则细胞，贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近，公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中，置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输；收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养，如无法立刻进行复苏操作，冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输；收到细胞后请镜下观察细胞生长状态，如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作，如悬浮的细胞较多，请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存：
1）细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用PBS清洗细胞一次；
2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1500rpm离心5min；
3）用适量的冻存液（基础培养基：FBS：DMSO=5:4:1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
4）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中， 1500rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
狗原代成骨细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验实验材料： 1. 骨组织来源：新生或胚胎大鼠、兔、人类胚胎或手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅡ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2。 实验方法： 1. 取生后1—2d大鼠若干只，拉颈处死
实验材料： 1. 骨组织来源：手术切除之骨组织； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2； 3. 消化液：0.25%胰蛋白酶溶液，1mg/mlⅠ型胶原酶溶液； 4. 培养液：RPMI 1640培养基，配制培养液时加入15%的小牛血清，并用5.6% NaHCO3 调节至pH 7.2. 实验方法：
我曾经做过原代培养的成骨细胞传代和骨髓基质细胞以及cos7细胞的传代。基本的操作过程都是：倒掉或者吸掉培养基37度预温的PBS洗涤细胞3次加入浓度为0.1％的胰酶和0.05％EDTA进行消化，添加的量看所用的培养瓶大小，可以在室温下消化，也可以在37度进行消化在显微镜下观察，等细胞成片脱离时，加入3毫升含血清培养基中止消化将细胞悬液转移到离心管中1000rpm离心5分钟收集细胞弃上清，再加入5毫升含血清培养基重悬细胞，再同样转速和时间离心一次弃上清，根据实际需要添加适量培养基重悬
