- ￥1300 - 3750
- 中创汇科
- 中国
- ZC-RTPCR-322
- 2026年01月04日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃±5℃保存，应避免反复冻融（不得超过5次）
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Hanta virus Detection Kit (Real-Time PCR Method)
- 库存：
按需
- 供应商：
中创汇科
- 规格：
25T/盒/50T/盒
| 规格： | 25T/盒 | 产品价格： | ￥1300.0-￥1950.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 50T/盒 | 产品价格： | ￥2500.0-￥3750.0 |
产品名称：汉坦病毒核酸检测试剂盒(探针法)
产品规格：25T/盒、50T/盒
产品货号：ZC-RTPCR-322
【预期用途】
本试剂盒用于血清样本中HV RNA的定性检测。实验结果仅供科学研究使用，不作为临床诊断依据。
【检验原理】
本试剂盒采用实时荧光PCR技术，针对HV特异基因设计特异性引物和探针，通过收集PCR扩增产生的荧光信号，确定待测目标是否含汉坦病毒。
【使用方法】
1. 样品处理（样本处理区）
1.1 RNA提取
建议使用商品化的RNA提取试剂盒进行提取，严格按照对应试剂盒说明书进行操作。
注：1.提取好的RNA应及时用于检测，否则应 - 70℃以下保存。
2.本品中的阴性对照需参与核酸提取；阳性对照不需参与核酸提取。
2. 试剂配制（试剂准备区）
从试剂盒中取出试剂进行室温解冻，颠倒混匀后瞬时离心。每个样品均应进行反应体系的PCR扩增。若待检样品数量为n，则按（n+1）个反应配制体系，建议增加阳性对照和阴性对照体系。将反应体系试剂加入适当体积的无菌离心管中，振荡混匀后瞬时离心，按20μL/管分装至八联PCR反应管，盖紧管盖并做好标记，转移至样本处理区进行加样操作。反应体系配制如下：
| 试剂 | HV反应液 | 酶混合液 |
| 用量 | 18μL | 2μL |
3. 加样（样本处理区）
将步骤1提取的RNA、阳性对照、阴性对照各取10μL，分别加入相应的反应管中，盖好管盖，混匀，短暂离心。
4. PCR扩增（核酸扩增区）
4.1 将待检测反应管置于荧光定量PCR仪反应槽内；
4.2 设置好通道、样品信息，反应体系设置为30μL；
荧光通道选择：Reporter Dye1：FAM，Quencher Dye1：NONE；Passive Reference：NONE。
4.3推荐循环参数设置：
| 程序1 | 程序2 | ||||||
| 阶段 | 循环数 | 条件 | 收集荧光信号 | 阶段 | 循环数 | 条件 | 收集荧光信号 |
| 1 | 1 | 50℃：10min | 否 | 1 | 1 | 50℃：5min | 否 |
| 2 | 1 | 95℃：2min | 否 | 2 | 1 | 95℃：1min | 否 |
| 3 | 42 | 95℃：5s | 否 | 3 | 42 | 95℃：5s | 否 |
| 55℃：30s | 是 | 55℃：10s | 是 | ||||
注：程序1适用于LightCycler480、ABI Prism 7500、ABIQ5、ABIQ7、STRATAGENE Mx3000p、BIO-RAD CFX96、雅睿 MA-6000 荧光 PCR 扩增仪；程序2适用于宏石 SLAN-96S、宏石 SLAN-96P、天隆 Gentier 96、ABIQ5、ABIQ7、BIO-RAD CFX96 荧光 PCR 扩增仪。
5. 结果分析判定
5.1结果分析条件设定
设置Baseline和Threshold：一般直接按机器自动分析的结果分析，当曲线出现整体倾斜时，根据分析后图像调节Baseline的start值(一般可在3~15范围内调节)、stop值(一般可在5~20范围内调节)，以及Threshold的Value值(上下拖动阈值线至高于阴性对照)，重新分析结果。
5.2对照标准
阴性对照：无明显扩增曲线，且无Ct值或Ct 值为0。
阳性对照：扩增曲线有明显指数增长，且Ct 值<33。
以上条件应同时满足，否则实验视为无效。
5.3结果判断
阳性：检测通道 Ct 值≤38，有明显指数增长。
可疑：检测通道 Ct 值在38～42 范围。此时应对样本进行重复检测，如重复实验结果 Ct 值≤38，有明显指数增长，则判定为阳性，否则为阴性。
阴性：检测通道 Ct 值为0 或无 Ct 值。
【检验结果的解释】
| 检测通道 | 检测结果 |
| FAM | 汉坦病毒HV |
【注意事项】
本试剂盒仅供临床参考和科学研究使用
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文献和实验时样本之间干扰。 Q：说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ，细胞量多的话对检测结果有没有影响？ A：建议细胞量最多不要超过 106个，过量的细胞相当于染料被稀释，影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了，通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q：是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer？ A：不行，Binding Buffer 是必须要加的，Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+，Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位：酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下，在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育，酶促反应开始进行，经过一定时间后，用终止液终止反应，通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量，除以时间即可
针对同一指标，生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗？
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律，但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图，如下所示： 延迟区：无规律可寻。 等速区：对应的是速率法，一般应用于酶活力的检测。 过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。 平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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