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糖原含量试剂盒,微板法

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  • ￥320
  • wksubio
  • WS1650W
  • 国内
  • 2025年12月23日
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    • 英文名：

      Glycogen Content Kit

    • CAS号：

      WS1650W

    • 保质期：

      3个月

    • 供应商：

      上海瓦兰生物

    • 保存条件：

      4℃

    • 规格：

      96T

    本试剂盒仅供科研使用
    糖原含量测定说明书
    （货号：WS1650W 微板法 96 样）
    一、产品简介：
    糖原是由葡萄糖分子通过糖苷键聚合而成的高分子物质，作为重要的能源物质储存于肝
    脏、肌肉和脑等重要器官。糖原的储存或代谢异常可引起多种疾病，因此测定糖原含量的
    变化，对研究糖原代谢及相关疾病有着重要的意义。
    采用蒽酮法：即利用强碱性提取液提取糖原，浓硫酸是糖原脱水生产糖醛衍生物，糖醛
    类与蒽酮作用，在 620nm 处有最大吸收峰，再与相同方法处理的葡萄糖标准液比色定量。
    二、试剂盒的组成和配制：
    试剂名称
    规格
    保存要求
    备注
    提取液
    液体 30mL×1 瓶
    4℃保存
    试剂一
    粉剂 mg×2 瓶
    4℃保存
    用前每瓶甩几下使粉剂落入底部，再加
    10mL 浓硫酸，充分溶解混匀后使用；用
    不完的试剂 4℃保存 4-5 天。
    标准品
    粉剂 mg×1 支
    4℃保存
    从标准管中称量取出 2mg 至一新 EP 管
    中，再加 2mL 蒸馏水溶解即
    1mg/mL
    的
    葡萄糖标准品溶液，
    再稀释
    50 倍即
    0.02mg/mL 标准品备用。
    三、所需的仪器和用品：
    酶标仪、水浴锅、可调式移液器、96 孔板、浓硫酸（不允许快递）和蒸馏水。
    四、糖原含量检测：
    建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验
    样本和试剂浪费！
    1、检测液制备：
    按照肝脏/肌肉样本质量（
    g）：提取液体积(mL)为 1：3 的比例加入提取液（如取
    0.1g 组织，加 0.3mL 提取液），盖紧管盖（用封口膜封口）95℃水解 20min，室温冷却
    后即为糖原水解液。
    ①肝糖原检测液：在冷却后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸馏水混匀总体积约 1mL，
    8000rpm 室温离心 5min，取上清液 100μL 至新 EP 管中，再加 900μL 蒸馏水即上清
    液稀释 10 倍后作为检测液测定。
    ②肌糖原检测液：在冷却后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸馏水混匀总体积约 1mL，
    8000rpm 室温离心 5min，取上清液 200μL 至新 EP 管中，再加 200μL 蒸馏水即上清
    液稀释 2 倍后作为检测液测定。
    ③糖原含量低的组织样本：在冷却后的糖原水解液 EP 管中加入 0.7mL 蒸馏水混匀总体
    积约 1mL，8000rpm 室温离心 5min，取上清液作为检测液测定。
    2、上机检测：
    ① 酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 620nm，所有试剂解冻至室温（25℃）。
    ② 在 EP 管中依次加入：本试剂盒仅供科研使用
    2
    【注】若 A 测定管值在零附近，可以增加测定管上样量 V 检测液（如增至 40μL），蒸
    馏水相应减少，则改变后的 V 检测液代入计算公式计算。
    五、结果计算：
    糖原含量(mg/g)=(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)×(C 标准×V 标)÷(V 检测液÷V×W)÷1.11×D
    =0.0018×(A 测定-A 空白)÷(A 标准-A 空白)÷(V 检测液÷V×W)×D
    V 标---0.1mL；
    V 检测液---0.01mL；
    W--取样量，g；
    V---提取液总体积，1mL；
    C 标准---标准品浓度，0.02mg/mL；
    D---样本测试前稀释倍数，肝糖原 D 值为 10，肌糖原 D 值为 2；
    1.11---是此法测得葡萄糖含量换算为糖原含量的常数。
    试剂名称
    （
    μL）
    空白管
    （只做一次）
    标准管
    （只做一次）
    测定管
    蒸馏水
    100
    90
    标准液
    100
    检测液
    10
    试剂一
    200
    200
    200
    混匀，置 95℃水浴 5min（盖紧，防止水分散失），冷却，
    取 200μL 转移至 96 孔板中，于 620nm 读取吸光值 A。

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