- ￥2990
- 晶抗生物
- 国内
- JK-R9997
- 2025年07月13日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
蜡状芽孢杆菌PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
芽孢杆菌属(Bacillus)中的一种。菌体细胞杆状，末端方，成短或长链，1.0~1.2×3.0~5.0 微米。产芽孢，芽孢圆形或柱形，中生或近中生，1.0~1.5微米， 孢囊无明显膨大。革兰氏阳性，无荚膜，运动。菌落大，表面粗糙，扁平，不规则。会引起食物中毒，中毒者症状为腹痛、呕吐腹泻。蜡状芽孢杆菌可产生抗菌物质，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的营养成分，改善生态环境。可产生细菌蛋白酶；可用于麻脱胶，是各种抗生素抗菌活性的测定菌。可用于明胶液化，牛奶胨化，还原硝酸盐，水解淀粉。
本产品是根据PCR 原理开发的蜡状芽孢杆菌检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增蜡状芽孢杆菌，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 蜡状芽孢杆菌 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 蜡状芽孢杆菌 PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL蜡状芽孢杆菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 蜡状芽孢杆菌PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（蜡状芽孢杆菌PCR阳性对照1000倍稀释液） | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验引起破伤风；肉毒梭菌、产气荚膜梭菌和蜡状芽孢杆菌引起食物中毒；韦氏梭菌和产气荚膜梭菌引起气性坏疽。对人有利的芽孢菌有枯草芽孢杆菌，产生工业或医疗用的蛋白酶、淀粉酶；丙酮丁醇梭菌用于生产丙酮丁醇；多粘芽孢杆菌生产多粘菌素；地衣芽孢杆菌生产杆菌肽；著名的细菌杀虫剂——苏云金芽孢杆菌能杀死100多种鳞翅目的农林害虫，现已扩大到杀蚊、蝇幼虫；日本甲虫芽孢杆菌、幼虫芽孢杆菌和缓病芽孢杆菌可用于防治蛴螬等地下害虫。芽孢杆菌分解有机物能力强，在自然界的元素循环中起重要作用。有些种（如多粘芽孢杆菌和巴氏梭菌
把卵磷酯水解为二甘油脂和胆碱磷酸酯，最早是在产气荚膜梭菌（ Clostridium perfrinsens）的α毒素中发现的，以后又在水肿梭菌（ C． oedematiens），溶血梭菌（ C． haemslyticum）、双酶梭菌（ C． bifermentans）和蜡状芽孢杆菌（ B． cereus）、蕈状芽孢杆菌（ B． mycoiddes）以及铜绿假单胞菌（ Pseudomonas ae－ ruginosa）、荧光假单胞菌（ Pseudomonas fluore－ scens）的培养
.在M.S.P培养基上生长更旺盛，菌落直径达8～10mm，质地更软，挑起来呈丝状，培养时间稍长，菌落表面呈毛玻璃状，并产生红色色素。在蛋白胨酶母膏平板上菌落为灰白色，不透明，表面较粗糙，似毛玻璃状或融蜡状，菌落较大。蜡状芽孢杆菌细菌对外界有害因子抵抗力强，分布广，是典型的菌体细胞，有部分菌株能产生肠毒素，呈杆状（约1.5μm），有色，孢子呈椭圆形，有致呕吐型和腹泻型胃肠炎肠毒素两类。
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