- ￥2990
- 晶抗生物
- 国内
- JK-R9185
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
避光低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
斜纹夜蛾核型多角体病毒PCR试剂盒
- 库存：
大量
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 规格：
50次
产品及特点：
斜纹夜蛾 斜纹夜蛾核型多角体病毒 （ Spodoptera lituraNucleopolyhedrovirus, SlNPV）是一种有效防治斜纹夜蛾的微生物农药，已广泛用于斜纹夜蛾的田间防治,具有害虫不易产生抗药性、对环境和非靶标生物安全、对斜纹夜蛾种群具有较高的致病和致弱作用等特点。然而室内饲养的斜纹夜蛾种群一旦感染 SlNPV，处理不当即可导致整个实验种群的灭绝，严重影响斜纹夜蛾相关研究工作的顺利进行。本公司开发了斜纹夜蛾核型多角体病毒的 PCR 检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供DNA模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增斜纹夜蛾核型多角体病毒，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 编号 | 成分 | 规格 |
| 试剂一 | PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（红盖） |
| 试剂二 | 超纯水 | 1 mL（亮黄色） |
| 试剂三 | 斜纹夜蛾核型多角体病毒 PCR 引物混合液 | 100 μL（白盖） |
| 试剂四 | 斜纹夜蛾核型多角体病毒 PCR 阳性对照（1×10E8 /μL） | 50 μL（黄盖） |
| 试剂五 | 使用手册 | 1 份 |
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样品DNA。
斜纹夜蛾核型多角体病毒PCR试剂盒
使用方法：
一、样品 DNA 的制备：
1. 用自选方法纯化N+2个样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。可以选用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N个样品，则需要做N+2个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求的样品起始量）中加10μL斜纹夜蛾核型多角体病毒PCR阳性对照的 1000 倍稀释液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）：
3. 对N+2个样品，在PCR时需要增加一个PCR阳性对照和一个PCR阴性对照，故需要设置N+4个反应。在N+4个PCR管中分别加入下列成分：
| 成份 | N+2 个样品管 | PCR 阴性对照 | PCR阳性对照 |
| PCR Magic Mix 3.0 | 各 20μL | 20μL | 20μL |
| 斜纹夜蛾核型多角体病毒PCR 引物混合液 | 各2μL | 2μL | 2μL |
| N+2个样品DNA模板 | 各18μL | -- | -- |
| PCR 阴性对照（水） | -- | 18μL | -- |
| PCR 阳性对照（斜纹夜蛾核型多角体病毒PCR阳性对照1000倍稀释液） | -- | -- | 18μL |
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
| PCR 反应35个循环 | 95℃ | 30 sec |
| 55℃ | 30 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 7 min |
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix 在 扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳 性对照必须有 551bp 大小的条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实 验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验，又要利用其特异病毒作为杀灭害虫的手段。 培养昆虫病毒主要采取组织培养和感染宿主两种方法，后者比较容易成功，使用更为广泛。本实验以斜纹夜蛾（Prodenialitura）核型多角体感染宿主来培养病毒。 斜纹夜蛾能危害棉花、蔬菜等多种作物。核型多角体病毒是多角体病毒侵入宿主细胞后，在细胞核内形成多角体，多角体内包含着很多病毒粒子。斜纹夜蛾多角体的形状有三角形、四角形、五角形、六角形和圆形，直径大小在1．2—3．4μm，用普通显微镜即可观察到。多角体蛋白可被碱性溶液溶解
病毒(LdMNPV) 、甜菜夜蛾多核衣壳核多角体病毒(SeMNPV)、棉铃虫核型多角体病毒(HaNPV)，以及斜纹夜蛾核型多角体病毒(SphMNPV)。目前AcMNPV基因组的研究最为深入，它是双链超螺旋大分子环状DNA，其大小为90～160kb，约编码154个基因。AcMNPV基因组的基因组织(gene organization)较为复杂，基因组的不同区域具有功能分化，基因的分布尚无规律可循，但AcMNPV基因组含有8个同源区，每区含有不等的重复或倒置重复序列，这些重复序列由位于中间的不完整回文
AcNPV ，Autographa califorinica nuclear polyhedrosis virus，苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 att ，attachmet site，接受位点 Apr ，Ampicillin replication sequence，氨卞青霉素抗性基因 ARS ，Autonomors replication sequence，自主复制序列 Adv ，Adenovirus，腺病毒 atRNA
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